大鼠角膜成纤维细胞 新品

商品属性

细胞简介

大鼠角膜成纤维细胞分离自眼角膜组织；角膜位于眼球前壁的一层透明膜，约占纤维膜的前1/6，从后面看角膜呈正圆形，从前面看为横椭圆形。角膜厚度各部分不尽相同，中央部最薄。角膜有十分敏感的神经末梢，如有外物接触角膜，眼睑便会不由自主地合上以保护眼睛。为了保持透明，角膜并没有血管，透过外界空气、泪液及房水获取养份及氧气。角膜分为五层，由前向后依次为：上皮细胞层、前弹力层、基质层、后弹力层、内皮细胞层。成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的角膜成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。角膜成纤维细胞在生理条件下的主要功能包括：构造和维持角膜的正常形态，合成和释放细胞外基质以及组织损伤后及时大量聚集修复损伤组织。
产品信息

产品名称 大鼠角膜成纤维细胞

组织来源 眼角膜组织

种属 大鼠
产品规格 5×10^5Cells/T25

方法简介：实验室分离的大鼠角膜成纤维细胞采用胰蛋白酶 - 胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：实验室分离的大鼠角膜成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：包被条件

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性：可传5代左右；3代以内状态最佳

消化液：0.25%胰蛋白酶大鼠角膜成纤维细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
生物特征

细胞组成：角膜基质层来源成纤维细胞（角膜基质细胞）

形态结构：细长梭形，透明胞质，平行层状排列，形态均一

分子标记：Vimentin、Collagen Ⅰ/Ⅴ、ALDH 阳性

功能特性：维持角膜基质透明、角膜损伤修复、角膜创伤纤维化调控

核心功能

合成角膜胶原纤维，维持角膜透明性、韧性与形态

参与角膜外伤、炎症后的组织修复与基质重塑

调控角膜纤维化、瘢痕形成，影响屈光与视觉功能

分泌抗炎因子，维持角膜局部免疫微环境平衡
原代细胞制备的关键操作要点

取材环节注意事项

动物组织取材需严格无菌，胚胎或幼鼠组织活力最佳，成年组织需尽快处理

实体瘤取材应选取细胞丰富的区域，避开坏死液化部分，血液样本需注意抗凝

所有操作需在冰上进行，尽量缩短组织暴露时间，维持细胞活性

消化过程控制

酶浓度和消化时间需根据组织类型调整，避免过度消化导致细胞损伤

胰蛋白酶消化温度应低于37℃，浓度为常规传代的一半（0.125%）

消化过程中需定期观察组织状态，待组织呈絮状即可终止

培养前处理

细胞悬液接种前需调整至合适密度（通常1×10^5 - 1×10^6 cells/mL）

需使用含血清、双抗和必要生长因子的完全培养基

接种后24-48小时内避免扰动，待细胞贴壁后再进行首次换液

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