真核生物18S核酸检测试剂盒
（PCR-荧光探针法）- 卢卡科技 Lookest
产品名称：真核生物18S核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）
品牌：卢卡科技（Lookest®）
货号：LK-18S-Uni（48T）
规格：48次/盒 0.1PCR管 48次/盒 0.2PCR管 48次/盒 非一管式
检测方法：实时荧光定量PCR（TaqMan探针法）
执行标准：通用型真核生物核酸检测规范，适配BJS 202412、BJS 202410等行业标准，可配套各类分子检测实验使用
适用仪器：兼容ABI、Bio-Rad、罗氏、博日、宏石、天隆等所有主流实时荧光定量PCR仪，开箱适配无需调试
检测靶点：真核生物18S rRNA基因高度保守区域，覆盖动物、植物、真菌等所有真核生物，种间通用性极强，特异性靶向真核生物专属序列
一、产品简介
卢卡科技（Lookest®）真核生物18S核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法），依托13年分子检测技术沉淀，针对所有真核生物（动物/植物/真菌）通用保守18S rRNA基因设计特异性引物与TaqMan荧光探针，专为真核生物核酸定性检测打造。
试剂盒采用预混式反应体系，含UNG酶防污染体系，操作简便、通用性强、灵敏度高、稳定性好，可快速、精准检测各类样品中的真核生物核酸，有效区分真核与原核生物，避免交叉误判。广泛适用于食品/饲料质检、海关检疫、第三方检测、科研实验、疾控筛查、企业内控等全场景，为真核生物成分鉴定、物种筛查、样品中真核成分有无判定提供核心技术支撑。
产品经多批次实验室验证与实际应用测试，性能稳定、结果准确，完全符合行业检测规范，可直接用于合规检测报告出具，确保检测数据可重复、可追溯。
二、产品核心优势
1. 全真核通用覆盖
靶向18S rRNA基因高度保守区域，1盒覆盖所有真核生物：动物类（畜禽、水产、宠物、人类、昆虫等）、植物类（粮食、果蔬、油料、饲料作物等）、真菌类（酵母、霉菌、食用菌等），彻底解决多物种真核检测需多套试剂的痛点，大幅降低检测成本。
2. 特异性极强，无交叉反应
特异性≥98%，仅特异性扩增真核生物18S rRNA基因，经50+常见物种交叉反应验证，与原核生物（细菌、支原体）、病毒、质粒、载体DNA无任何交叉反应，靶点保守性强，不同真核生物间无种内差异，杜绝假阳性结果。
3. 超高灵敏度，适配微量检测
最低检测限低至10-100拷贝/反应，质量分数检出限≤0.001%，可稳定检测样品中微量、降解的真核生物核酸，适配高温、腌制、辐照等深度加工样品，避免漏检；样品DNA浓度1ng/μL-100ng/μL均可正常检测，无需额外调整浓度，降低操作门槛。
4. 全流程质控保障
配套完整阴阳性对照体系，可有效验证PCR反应体系有效性，排查试剂失效、体系配制错误、样品提取失败等问题，避免检测偏差，符合行业“全程质控”要求，确保检测结果可靠。
5. 预混即开，操作高效
2×预混式反应体系，已提前配制热启动Taq酶、dNTPs、特异性引物探针、PCR缓冲液等核心组分，无需手动分步配液，新手按说明书即可快速上手；单批检测全程60-80分钟，适配96孔高通量批量检测，大幅提升检测效率。
6. 防污染设计，稳定性突出
配备UNG酶防污染体系+dUTP设计，可降解残留PCR扩增产物，结合闭管检测模式，杜绝实验室气溶胶污染；-20℃避光保存，有效期12-15个月，反复冻融≤5次性能无明显下降，批次间变异系数（CV）<5%，Ct值偏差≤0.8，确保批次一致性。
7. 强抗干扰，适配复杂基质
可耐受食品、饲料、组织样品中常见干扰物质（多糖、多酚、油脂、盐、腐殖酸等），即使在高干扰复杂基质样品中，仍可稳定检测，避免假阴性结果，适配各类检测场景。
三、核心性能参数
1. 灵敏度（适配微量真核成分检测）
核酸检测限：10-100拷贝/反应，微量真核核酸可稳定检出；
质量分数检出限：≤0.001%（极端微量真核成分），远优于行业平均水平；
适用DNA浓度：1ng/μL-100ng/μL，无需额外调整浓度，降低操作难度；
降解DNA适配：可有效检测高温、腌制、辐照、高压灭菌等导致的降解真核DNA，避免漏检。
2. 特异性（真核专属，无交叉误判）
物种特异性：仅扩增真核生物DNA，与细菌、支原体、病毒等原核生物无任何交叉反应；
靶点特异性：靶向18S rRNA基因保守区，不与其他基因序列结合，检测结果精准；
交叉验证：经50+常见物种（畜禽、水产、植物、微生物）交叉测试，无假阳性反应。
3. 稳定性（保障批次一致，耐用性强）
保存稳定性：-20℃避光密封保存，有效期12-15个月，适配实验室长期储存需求；
运输稳定性：采用干冰冷链运输（温度≤-20℃），运输时间≤72小时，性能无衰减；
批次间稳定性：变异系数（CV）<5%，不同批次产品检测同一阳性样品，Ct值偏差≤0.8，符合行业重复性要求；
抗干扰稳定性：耐受样品中常见干扰物质，复杂基质样品检测稳定，避免假阴性。
4. 准确性（全程质控，结果可追溯）
质控体系：每盒试剂盒均配套真核生物阳性对照、阴性对照，可有效验证PCR反应体系有效性，排查实验故障；
防污染设计：UNG酶防污染体系+闭管检测模式，杜绝实验室交叉污染，符合行业实验室操作规范；
结果判定：严格按行业标准Ct值阈值判定，结果清晰明确，无需复杂分析，可直接用于合规检测报告出具。
四、产品组成（标准配套，即开即用）
组件名称 | 规格 |
|---|
A-18S-P（18S PCR反应预混液） | 20μL×8管×6排 |
NG-P（阴性对照） | 100μL×2支 |
PG-18S-P（阳性对照） | 100μL×1支 |
产品说明书 | 1份 |
五、适用样品与场景（全领域覆盖，符合行业适用范围）
本试剂盒适配各类真核生物核酸检测场景，完全符合行业检测规范，重点覆盖以下核心场景：
1. 食品/饲料检测（核心应用场景）
生鲜/加工类：生鲜肉类、肉制品、水产、罐头、卤味、速冻食品、方便食品等；
饲料类：配合饲料、浓缩饲料、饲料原料（肉骨粉、鱼粉、动物内脏粉等）、宠物食品；
特殊食品：清真食品、动植物混合制品、掺假鉴定（排查真核成分有无）。
2. 科研与疾控实验
真核生物定性/定量检测、物种筛查、微生物组（真菌18S）分析；
环境样本检测：土壤、水体、空气等环境中真核生物筛查；
生物样本检测：细胞、组织、石蜡切片、FFPE样本真核核酸检测。
3. 海关/质检/第三方实验室
4. 企业内控与科研应用
六、实验操作流程（标准通用，新手可直接操作）
全程严格遵循行业检测规范，操作简单易上手，无需专业分子生物学经验：
1. 样品DNA提取
按标准方法对样品进行粉碎、均质，采用常规基因组DNA提取方法（可使用卢卡科技配套DNA提取试剂盒）提取样品总DNA，确保DNA纯度OD260/OD280=1.8-2.0，浓度1-100ng/μL，避免杂质干扰。
2. 反应体系配制（25μL体系）
在无菌离心管/96孔PCR板中，依次加入A-18S-P预混液20μL、样品DNA（或阳性/阴性对照）5μL，轻轻颠倒混匀，5000rpm离心30秒，避免气泡产生。
3. PCR扩增程序
将配制好的反应体系放入荧光定量PCR仪，设置标准扩增程序：50℃ 2min（UNG酶防污染消化）；95℃ 10min（预变性）；95℃ 15s → 60℃ 30s（收集FAM通道荧光），共40个循环，启动扩增程序。
4. 结果判读
扩增结束后，严格按行业标准判定规则，结合阴阳性对照结果，对样品进行结果判定。
5. 实验收尾
规范处理实验废弃物，清洁实验台面与器具，紫外消毒实验室环境，符合行业实验室清洁要求。
七、结果判定标准（行业统一，可直接用于合规报告）
严格遵循行业检测规范判定规则，确保结果统一、合规、可追溯：
第一步：实验有效性判定
需同时满足以下两个条件，本次实验结果方为有效，否则实验无效，需重新检测：
第二步：样品结果判定
18S通道（FAM）检测结果 | 判定标准 | 最终结论 |
|---|
阳性 | Ct≤35，且有典型指数增长扩增曲线 | 样品中检出真核生物核酸 |
可疑 | 35<Ct<40，有扩增曲线 | 需重复检测，重复后Ct≤35判定为阳性，否则为阴性 |
阴性 | Ct≥40或无扩增曲线 | 样品中未检出真核生物核酸 |
备注：检测前需确保DNA提取符合行业标准要求，深度加工、高干扰复杂基质样品，需优化提取流程确保核酸完整性，保障检测结果可靠。
八、储存、运输与有效期
储存条件：-20℃避光密封保存，避免反复冻融（建议分装保存），防止试剂性能损耗；
运输条件：采用干冰低温运输（运输过程温度保持-20℃以下），运输时间≤72小时，收到试剂盒后需立即放入-20℃冰箱保存，避免试剂失效；
有效期：在规定储存条件下，试剂盒有效期为12-15个月（具体以产品外包装标注为准），超过有效期的试剂请勿使用；
开封注意事项：试剂盒开封后，建议在1个月内使用完毕，减少反复冻融对试剂性能的影响。
九、常见问题解答
1. 实验无扩增曲线，可能是什么原因？
答：① 样品DNA提取失败或降解，需按行业标准流程重新提取，确保DNA纯度与浓度达标，尤其深度加工样品需优化提取流程；② PCR反应体系配制错误，检查试剂添加量、是否漏加试剂；③ 仪器扩增程序设置错误，参考说明书调整参数，确保荧光通道选择正确；④ 试剂过期或储存不当，检查试剂储存条件与有效期。
2. 阴性对照出现扩增曲线，如何处理？
答：大概率存在实验室污染或试剂污染，需更换阴性对照试剂，全面清洁实验台面、移液器、枪头、离心管等实验器具，紫外消毒实验室环境后重新实验；若仍出现扩增，需更换新批次试剂。
3. 试剂盒能否区分真核生物与原核生物？
答：可以。本试剂盒仅特异性扩增真核生物18S rRNA基因，经严格交叉反应验证，与细菌、支原体等原核生物无任何交叉反应，可精准区分真核与原核生物，杜绝交叉误判。
4. 试剂盒是否符合行业标准，可用于官方检测与报告出具吗？
答：可以。本试剂盒完全适配BJS 202412、BJS 202410等行业标准，检测流程、扩增参数、质控体系、结果判定均符合行业要求，可用于市场监管、海关检疫、第三方检测、司法鉴定等合规场景，检测结果可直接用于报告出具。
5. 试剂盒能否检测深度加工的样品？
答：可以。本试剂盒灵敏度高、抗干扰能力强，可有效检测高温、腌制、辐照、高压灭菌等深度加工样品中降解的真核生物核酸，适配各类复杂基质样品的检测需求，避免漏检。
十、品牌与服务保障
广州卢卡科技有限公司（Lookest®）是专注分子检测技术研发、生产与服务的高新技术企业，依托13年行业沉淀，联合中国水产科学研究院南海水产研究所、珠海市农产品质量与食品安全重点实验室两大权威科研平台，打造从试剂研发、生产到技术服务的全链条体系，产品覆盖动物源性成分鉴定、植物源性检测、转基因筛查、食源性致病菌检测、水产病害检测、真核生物检测等多个领域，服务网络覆盖全国60+检测服务网点。
公司拥有GMP标准化生产车间与完善的质量控制体系，每批次产品均通过灵敏度、特异性、稳定性、准确性四重验证，附带行业质检报告，确保产品完全符合行业标准要求，性能稳定可靠。同时提供全流程技术支持，包括行业标准操作培训、样品处理优化、实验故障排查、定制化检测方案开发，售后24小时内响应，助力用户高效完成合规检测。
