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MCF-7 / mRFP-EGFP-LC3稳转细胞株

MCF-7 / mRFP-EGFP-LC3
上海 更新日期:2017-03-19

上海科远迪生物科技有限公司

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产品详情:

中文名称:
MCF-7 / mRFP-EGFP-LC3稳转细胞株
英文名称:
MCF-7 / mRFP-EGFP-LC3
品牌:
sciencelight
产地:
中国
保存条件:
-80℃储存

MCF-7 / mRFP-EGFP-LC3稳转细胞株

质粒来源:Addgene # 21074 ( 载体pEGFP-C1+mRFP;插入基因 Rat LC3B,GenBank ID: U05784 )

背景:自噬为机体在亚细胞水平的“自我吞噬”,可以帮助细胞维持自身稳态及适应应激环境。近年来,自噬已成为生物学领域中的一个研究热点。迄今研究发现,自噬可以参与多种疾病的发生发展,例如肿瘤,心血管疾病,神经退行性疾病等。因而,自噬在各类相关疾病研究中作为药物筛选靶点越来越受关注和讨论。自噬研究的基础是有效地观察,定量细胞中自噬的发生。而目前应用较为广泛的自噬检测方法为观察GFP-LC3荧光斑,细胞正常生理环境LC3呈弥散状分布,自噬激活时LC3会转移至自噬囊泡上,因此,GFP荧光的弥散或斑点状聚集可以比较准确的反应细胞状态。

由于分子生物学的发展,现在已经诞生了mRFP-GFP-LC3 双荧光自噬指示体系,用于标记及追踪LC3以及自噬流的变化。其中GFP是酸敏感型GFP蛋白,而mRFP是稳定的荧光表达基团,不受外界影响。由于自噬小体进入第二阶段后,与溶酶体进行融合,形成自噬溶酶体。自噬溶酶体由于溶酶体内部的酸性环境,可以导致PH下降,GFP淬灭,因此,GFP的减弱可指示自噬溶酶体形成的顺利程度,GFP越少,则从自噬小体到自噬溶酶体阶段流通得越顺畅。反之,自噬小体和溶酶体融合被抑制,自噬溶酶体进程受阻。mRFP是一直稳定表达的,因而可以通过GFP与mRFP的亮点比例来评价自噬流进程。

优点:mRFP-EGFP-LC3稳转细胞株可以稳定持续的表达mRFP-EGFP-LC3,能够有效地解决瞬转实验的效率低、周期长、操作繁琐、不稳定等问题,有利于保证实验结果稳定性与可重复性。mRFP-GFP-LC3 双荧光自噬指示体系的出现,把自噬研究带入了一个新的阶段,自噬不再只是指标,而是一种机制,自噬流的顺畅与否,对于细胞生理功能的稳定非常关键。

培养条件:

置于37℃、5%CO2培养箱中,用含10%胎牛血清(FBS; GIBCO)和1%双抗(100 U/ ml青霉素和100 μg/ ml链霉素,GIBCO)的高糖DMEM培养基培养,培养三天(密度大概80%)按照1:3的比例传代。

维持压力:puro 500ng/ml

亮点比例计算:image j软件

LC3稳转细胞株

公司简介

上海科远迪生物科技有限公司成立于2007年,致力于活体生物发光、荧光成像技术和医学冻存技术在中国的推广和应用!目前在南京、杭州等地有10多家代理商。人民卫生出版社2010年出版的《高等学校创新教材-医学实验技术系列》之《组织学与胚胎学实验技术》分册首次将活体动物体内功能成像技术(该书第十一章)写进医学院校教材,标志着该技术在国内的普及应用又上新台阶!本公司创始人参与了第十一章 《活体动物体内功能成像技术》的编写工作!本公司与交通大学第六人民医院合作完成的 《活体生物发光成像技术及其在消化道研究领域中的应用》一文发表在《胃肠病学和肝病学杂志》2010年第四期,本项目由上海市自然科学基金项目(No.04ZB14072) 资助。本公司与浙江大学基础医学院李继承教授,李冬梅博士合作完成的《小动物活体成像技术研究进展》一文发表在《中国生物医学工程学报》2009,28(6):916-921。? ? 我们经过长期的实验研究与反复验证,研发出一系列Livecyte?即用型细胞冻存液系列产品,能有效地提高常规细胞、原代细胞与干细胞的复苏后存活率与活力。产品质量稳定可靠、使用方便,助力科研工作者摆脱程序繁琐、操作复杂、容易污染的传统冻存方法,专注于后续实验研究。该系

成立日期 (17年)
注册资本 10万人民币
员工人数
年营业额
经营模式 试剂,定制,服务
主营行业 通用试剂,基础有机试剂,技术服务,生物技术服务

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