荧光素钾盐

D-luciferin，potassium salt荧光素产品说明书

发光原理

哺乳动物生物发光，一般是将Firefly luciferase基因（由554个氨基酸构成，约50KD）即荧光素酶基因整合到预期观察的细胞染色体DNA上以表达荧光素酶，培养出能稳定表达荧光素酶的细胞株，当细胞分裂、转移、分化时, 荧光素酶也会得到持续稳定的表达。基因、细胞和活体动物都可被荧光素酶基因标记。将标记好的细胞接种到实验动物体内后，当外源（腹腔或静脉注射）给予其底物荧光素(D-luciferin，potassium salt，以下均简称荧光素)，即可在几分钟内产生发光现象。所发的光波长在540-600nm。这种酶在ATP，氧存在的条件下，催化荧光素的氧化反应才可以发光，因此只有在活细胞内才会产生发光现象，并且发光光强度与标记细胞的数目线性相关。

结构与性能

荧光素在氧气、ATP存在的条件下和荧光素酶发生反应，生成氧化荧光素(oxyluciferin)，并产生发光现象。荧光素是腹腔注射或尾部静脉注射进入小鼠体内的，约一分钟就可以扩散到小鼠全身。荧光素的半衰期约三个小时，只有活细胞才能够持续表达荧光素酶。

(1) 荧光素不会影响动物的正常生理功能。

(2) 荧光素是280道尔顿的小分子，水溶性和脂溶性都非常好，很容易穿透细胞膜和血脑屏障。

(3) 荧光素在体内扩散速度快，可通过腹腔注射或尾部静脉注射进入动物体内。腹腔注射扩散较慢，持续发光长。荧光素腹腔注射老鼠后约1min后表达荧光素酶的细胞开始发光，10min后强度达到稳定的最高点，在最高点持续约20~30 min后开始衰减，约3h后荧光素排除，发光全部消失，检测时间是在注射后15~35min之间；若进行荧光素静脉注射，扩散快，但发光持续时间很短。科研人员根据大量的实验总结出荧光素的合适的用量是150mg/kg，即体重20克的小鼠需要3毫克的荧光素。

(4) 观察时间的间隔没有最短限制，只要观察的条件控制一致就可以。虽然底物在动物体内有一定的代谢过程，但是上一次底物的残留曲线可以知道，可以控制对下一次观察结果的影响。

储存与运输

一般放在-20℃的冰箱即可，半年以上不使用放在-80℃的冰箱，溶解配制后放在4℃冰箱，短期运输放在4℃环境。

应用领域

肿瘤，干细胞，药物开发，基因治疗，转基因小鼠，免疫学等等。

成像效果

1. 检测灵敏度（所用细胞为本公司生物发光的肝癌细胞）

从左到右依次注射的细胞为100个，1000个，10000个；曝光时间依次为20秒，5秒，5秒。所用仪器为本公司的NightOWL Ⅱ LB983 NC100活体成像系统。检测地点为中国军事医学科学院。  

1. 成像效果展示（所用细胞为本公司生物发光的胰腺癌细胞）

胰腺癌原位接种，检测地点为中国科学院，所用仪器为Lumina Ⅱ。