猪布鲁氏杆菌PCR检测试剂盒 新品

本试剂盒针对猪布鲁氏杆菌特异性基因研发PCR扩增体系，可精准检测猪血液、精液、子宫分泌物、猪胎儿组织样本中的病原菌核酸。猪布鲁氏杆菌主要造成母猪流产、公猪生殖障碍，严重影响生猪繁育产能，试剂盒灵敏度高、特异性强，可规避猪体内其他菌群干扰。适用于规模化猪场繁育种群筛查、感染病例确诊、引种检疫及生猪布鲁氏菌病专项防控。

基础原理：

荧光 qPCR 靶向猪布鲁氏菌特异性毒力操纵子基因，检测猪淋巴结、精液致病菌核酸。

普通 PCR 扩增猪布鲁氏菌特有 IS711 插入片段，电泳区分其他家畜布鲁氏菌。

精液样本去杂质直扩 PCR，简化前处理流程，猪场批量筛查适用。

‌操作步骤‌：

样本处理（样本处理区）

推荐使用磁珠法或离心柱法提取核酸，避免交叉污染。

试剂配制（试剂准备区）

反应体系（20μL/管）：19μL反应液 + 1μL酶液，分装后加入5μL待测核酸或质控品。

PCR扩增（核酸扩增区）

循环参数：

预变性：95℃ 2min（1循环）；

扩增：95℃ 15sec → 60℃ 30sec（45循环，60℃时采集荧光信号，FAM通道）。

结果分析

阳性：Ct值≤40，扩增曲线呈指数增长；

阴性：无Ct值或曲线平直；

可疑：40<Ct≤45，需复测确认。

质控要求：阳性质控Ct≤32，阴性质控无扩增。

‌注意事项‌：

所有试剂避免反复冻融，可分装小体积冻存；融化后冰上放置不超过 2 h，酶失活会直接导致无扩增条带

阳性质粒拷贝数极高，开盖全程在生物安全柜操作，防止气溶胶污染实验室

所有耗材必须无核酸酶，枪头一次性使用；实验后 PCR 管、废液 121℃高压灭菌后丢弃

试剂盒出现浑浊、变色、结冰分层、过期禁止使用

仅限科研检测，严禁用于人体临床疾病诊断、食品出厂检疫等合规检测场景

土壤、粪便、腐殖质样本优先使用磁珠法提取核酸，减少抑制剂干扰

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