蛋白酶K

一、基础信息

• 来源：真菌 Parengyodontium album（旧称 Tritirachium album，林伯氏白色念球菌）

• 分子量：约 28.9 kDa

• 活性中心：催化三联体 Asp39–His69–Ser224

• 命名由来：可高效降解角蛋白（Keratin），故称 “K”

二、酶学特性（关键）

• 底物特异性：广谱切割，优先水解疏水 / 脂肪族 / 芳香族氨基酸（Ala、Leu、Ile、Val、Phe、Tyr）羧基端肽键；对 Pro、Gly、Glu/Asp 位点切割弱

• pH 范围：4.0–12.5（最适 7.5–9.0）

• 温度稳定性：**20–60℃** 稳定，常用 55–56℃（耐热，不易失活）

• 抗性极强：耐受 2% SDS、4M 尿素、2M 异硫氰酸胍、EDTA（螯合剂不影响活性）

• Ca²⁺作用：非催化必需，但可显著提升热稳定性