大鼠淋巴管内皮细胞

细胞简介：

大鼠淋巴管内皮分离自淋巴管组织；淋巴管由毛细淋巴管汇合而成。其形态结构与静脉相似，但管径较细，管壁较薄，瓣膜较多且发达，外形呈串珠状。淋巴管根据其位置分为浅、深二种。它们管位于皮下，常与浅静脉伴行，收集皮肤和皮下组织的淋巴。深淋巴管与深部血管伴行，收集肌肉和内脏的淋巴。浅、深淋巴管之间有广泛的交通支。淋巴管在向心行程中，通常经过一个或多个淋巴结，从而把淋巴细胞带入淋巴液。主要功能是滤过淋巴液，产生淋巴细胞和浆细胞，参与机体的免疫反应。当局部感染时，细菌、病毒或癌细胞等可沿淋巴管侵入，引起局部淋巴结肿大。如该淋巴结不能阻止和消灭它们，则病变可沿淋巴管的流注方向扩散和转移。淋巴管内皮细胞（LEC）是衬覆于淋巴管内表面的一种单层扁平上皮，是构成淋巴管壁的主要结构，参与维持体液平衡，调节淋巴细胞再循环和机体的免疫反应和组织液及蛋白质的运输，在疾病过程中也起着重要作用。近年研究表明，LEC还在伤口愈合、淋巴管水肿和炎症扩散等病理过程中起重要作用，而且与肿瘤转移密切相关。淋巴管内皮细胞主要功能：①调节体液、蛋白和组织压力平衡；②为免疫系统的重要组成部分。淋巴管内皮细胞与主要病生理变化：①囊肿型淋巴管瘤；②淋巴管炎；③淋巴结核。

产品信息:

产品名称 大鼠淋巴管内皮细胞

组织来源 淋巴管

默认种属 大鼠

产品规格 5×10^5Cells/T25

方法简介 公司实验室分离的大鼠淋巴管内皮采用消化法结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测 公司实验室分离的大鼠淋巴管内皮经VEGFR3免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息

包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 内皮细胞样

传代特性 可传2-3代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

大鼠淋巴管内皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

细胞培养步骤：

1. 细胞复苏

运输与接收：细胞以液氮冻存形式运输，收到后立即用75%酒精喷洒消毒细胞瓶，置于超净台内无菌操作。

复苏操作：将细胞瓶放入37℃、5% CO培养箱中静置3-4小时稳定状态，显微镜下观察细胞形态和密度，记录初始状态（建议40x、100x、200x各拍一张照片）。

2. 细胞传代

传代时机：当细胞密度达80%汇合度时进行传代。

操作步骤：

弃去旧培养基，用无钙镁PBS润洗细胞1-2次。

加入0.25%胰蛋白酶消化液（1-2 mL），37℃孵育1-2分钟，显微镜下观察细胞变圆脱落。

加入5 mL完全培养基终止消化，轻轻吹打使细胞完全脱落。

离心（1000 RPM，5分钟），弃上清，用1-2 mL培养基重悬。

按1:2比例分瓶传代（如T25瓶分至两个T25瓶），补充新鲜培养基至5 mL。

换液频率：每2-3天换液一次。

3. 细胞冻存

冻存液：使用无血清冻存液。

冻存步骤：细胞传代后，用胰蛋白酶消化并离心，重悬于冻存液，缓慢降温至-80℃，最终转入液氮长期保存。

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使用细胞进行实验，请注意以下几点：

代数控制：尽量在低代数（如P3-P10）进行实验，以防止因传代过多导致的遗传漂移或功能衰退。

操作轻柔：原代细胞对环境变化敏感，解冻和传代时需格外小心，避免机械损伤。

营养需求：它们往往需要更复杂的营养成分（如特定的生长因子、血清），普通的培养基可能无法满足其生长需求。