人心肌细胞 新品

人心肌细胞

产品信息：

产品名称 人心肌细胞

组织来源 心脏组织
种属 人

产品规格 5×10^5Cells/T25

培养信息：

方法简介：实验室分离的人心肌细胞采用胶原酶-胰酶联合消化法结合差速贴壁法，并用化学试剂抑制法筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：实验室分离的人心肌细胞经α-Sarcomeric actin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

产品名称：人心肌细胞

组织来源：心脏组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

培养信息：包被条件PLL(0.1mg/ml)

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：梭形、多角形

传代特性：属于终末分化细胞；属于不增殖细胞群

消化液：0.25%胰蛋白酶人心肌细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞简介 ：

人心肌细胞分离自心脏组织；心脏是脊椎动物身体中最重要的一个器官，主要功能是为血液流动提供压力，把血液运行至身体各个部分。心脏由心肌构成，左心房、左心室、右心房、右心室四个腔组成。左右心房之间和左右心室之间均由间隔隔开，故互不相通，心房与心室之间有瓣膜(房室瓣)，这些瓣膜使血液只能由心房流入心室，而不能倒流。心脏的作用是推动血液流动，向器官、组织提供充足的血流量，以供应氧和各种营养物质，并带走代谢的终产物(如二氧化碳、无机盐、尿素和尿酸等)，使细胞维持正常的代谢和功能。心肌细胞呈菱形、多边形等不规则形状；细胞培养2h后开始贴壁，呈梭形；到12h左右，细胞开始伸出伪足，呈菱形、多角形；细胞分离培养48h以后，大部分伸出伪足、呈巴掌状，部分心肌细胞会出现搏动；心肌细胞为终末分化细胞，在体外不增殖。体外培养的心肌细胞可保持结构及功能上的某些特点，并具有自发性节律搏动，且心肌细胞的培养具有简便、定量、重复性好以及不受神经体液因素的影响等特点。利用培养的心肌细胞在探索非血液动力学因素所致的心肌肥厚的调节，研究心肌细胞的生物力学、凋亡、受体下调、缺血预处理、信号通路、对作用于心脏的新药进行筛选并对其安全性进行评价以及从培养的心肌细胞中提取有价值的生物因子等方面具有广阔的应用前景，对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。
操作过程：

组织消化的细节：

分阶段消化：对于致密组织（如肾脏、乳腺），可先剪碎至1mm³左右的小块，用PBS清洗2-3次去除血液和杂质，再进行酶消化，避免杂质影响酶的活性。

间歇振荡消化：消化过程中可将培养瓶置于摇床上，以60-80rpm的速度轻微振荡，促进酶与组织充分接触，提高消化效率。

细胞计数与接种：

计数前混匀：细胞悬液需充分混匀后再取样计数，避免细胞沉降导致计数误差；计数时至少计数2个方格，取平均值提高准确性。

接种后静置：细胞接种后将培养瓶置于培养箱内静置2-4小时，期间不要晃动，让细胞自然贴壁，之后再轻轻更换培养位置。

换液与传代的技巧：

换液留底液：换液时不要完全倒掉旧培养基，可保留10%左右的底液，减少细胞环境的突变，帮助细胞适应新培养基。

传代避免过度消化：原代细胞对胰蛋白酶更敏感，传代时消化时间比传代细胞短2-3分钟，镜下观察到细胞边缘收缩、开始脱落时即可终止消化。
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原代细胞实验常见问题：

污染防控：实验全程严格无菌操作，超净工作台使用前紫外消毒30分钟，实验用品需高压灭菌；定期对培养箱、水浴锅等设备进行清洁和消毒，避免细菌、真菌、支原体污染。

细胞老化与分化：原代细胞传代次数有限，通常传至3-5代后会出现老化，需及时冻存早期代次细胞；培养过程中避免过度传代、营养缺乏、环境刺激等因素，防止细胞自发分化。

实验重复性保障：每次实验使用同一来源、同一代次的细胞，严格控制实验条件（如培养基批次、消化时间、培养时间等），设置足够的重复样本，减少实验误差。