BAR基因核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法） 新品

 产品介绍：

产品性质与用途

检测目标：专门用于检测 BAR基因（Bialaphos Resistance gene，双丙氨膦抗性基因）。

应用背景：BAR基因（也称为PAT基因）是一种常用的抗除草剂筛选标记基因。它广泛存在于转基因玉米、大豆、油菜、棉花等作物中，能使植物对除草剂（如草铵膦）产生抗性。

主要用途：用于食品、饲料、农产品及加工品中转基因成分的定性筛查与鉴定。

技术原理：采用实时荧光定量PCR（qPCR）技术，基于TaqMan荧光探针法。

优势：特异性极强（引物和探针双重识别），定量线性范围宽，结果判读客观，是目前国内外转基因检测标准中推荐的主流方法。

操作流程与关键参数

根据同类产品的说明书，操作通常包括以下步骤：

步骤  操作内容  关键参数/注意事项

1. 样本制备  从待测样本（如粮食、饲料、食品）中提取基因组DNA。  必须使用高质量的DNA提取试剂盒，且需防止交叉污染。

2. 试剂配制  将PCR反应液、引物和探针（通常已预混）分装至PCR管中。  需在冰上操作，避光保存反应液，避免反复冻融。

3. 加样  向反应管中加入提取的DNA模板（通常为5μL）。  必须设置对照：阴性对照（无菌水）和阳性对照（含BAR基因的质粒或标准品）。

4. 扩增反应  在荧光定量PCR仪上运行程序。  荧光基团：FAM（通常）

淬灭基团：TAMRA 或 BHQ

循环条件：通常为95℃预变性5分钟，随后40个循环（95℃ 15秒 → 60℃ 60秒）。

5. 结果判读  分析扩增曲线和Ct值。  阳性：Ct值<35-38，扩增曲线呈典型“S”型。

阴性：Ct值≥40或无Ct值。

可疑：38≤Ct值<40，需重复实验。

4. 性能特点

高特异性：针对BAR基因保守区域设计，与其他非靶标基因组无交叉反应。

高灵敏度：检出限通常可达 0.1%（质量分数），部分产品灵敏度可达 100-500拷贝/毫升。

适用范围广：适用于农作物植株、种子、饲料、米粉、面粉、豆制品、罐头食品等多种样本类型。

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实验操作规范

严格分区操作：试剂配制区、样本处理区、扩增区需物理隔离，防止气溶胶污染。

每次实验需设置阴性对照（无模板DNA）、阳性对照（已知PAT基因样本）及空白对照（仅缓冲液）。

加样时避免过量或不足，推荐低容量反应管以提高热传导率。

污染防控

定期监测实验室空气、加样枪及仪器表面污染，可通过擦拭采样后扩增验证。

扩增产物需在专用区域处理，避免开盖时形成气溶胶污染。