人气管上皮细胞
产品信息:
产品名称 人气管上皮细胞
组织来源 气管
种属 人
产品规格 5×10^5Cells/T25
英文名称 | Human Tracheal Epithelial Cells | 规格 | 5×105 |
细胞形态 | 上皮细胞样 | 货号 | P-X1255 |
培养信息:
方法简介:实验室分离的人气管上皮细胞采用链霉蛋白酶 - 中性蛋白酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:实验室分离的人气管上皮细胞经PCK免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称:人气管上皮细胞
组织来源:气管
产品规格:5×10⁵Cells/T25培养瓶
培养信息:包被条件鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:上皮细胞样
传代特性:可传2-3代
消化液:0.25%胰蛋白酶人气管上皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞简介 :
人气管上皮细胞分离自气管组织;气管(Trachea),呼吸器官的一部分;为后壁略平的圆筒型管状。上端平第六颈椎下缘,与环状软骨相连;向下至第四、五胸椎体(相当胸骨角平面)交界处,分左、右主支气管,分叉处称为气管杈。气管主要由14-16个半环状软骨构成,有弹性,软骨为“C”字形的软骨环,缺口向后,各软骨环以韧带连接起来,环后方缺口处由平滑肌和致密结缔组织连接,保持了持续张开状态。管腔衬以粘膜,表面覆盖纤毛上皮,粘膜分泌的粘液可粘附吸入空气中的灰尘颗粒,纤毛不断向咽部摆动将粘液与灰尘排出,以净化吸入的气体。气管上皮是气道与外界环境接触的第一道防线,不仅是各种病原体、炎症介质作用的靶细胞,还作为效应细胞合成、释放多种炎性介质和细胞因子从而参与气道炎症及免疫反应。体外培养的原代气管上皮细胞因与体内组织在形态结构和功能活动上存在很大的相似性,因此,在基础及临床研究中极为重要。
原代细胞实验要点:
一、取材与分离
新鲜、无菌:组织离体越快越好,全程冰上操作。
去除杂质:剔除脂肪、结缔组织、血污,减少污染和消化干扰。
温和消化:
控制酶浓度、温度、时间
及时终止消化,避免细胞过度损伤
过筛过滤:去除组织块,获得单细胞悬液。
二、接种与培养
密度关键:原代细胞普遍怕稀,密度太低不贴壁、不长。
完全贴壁后再换液:刚接种别乱动。
专用培养基:
内皮、上皮、平滑肌、神经元等尽量用专用原代培养基
血清质量影响极大,建议批次验证
CO₂、湿度、温度严格稳定,避免频繁开关门。
三、传代与冻存
不要等太满:汇合度 70%–80% 就传,不要等到堆积。
消化监控:镜下观察细胞变圆、间隙变大立即终止。
冻存保护:
标准:90% 血清 + 10% DMSO
程序降温,尽快转入液氮
原代细胞冻存复苏能力弱,尽量早冻、多冻。
四、污染与状态判断
一旦浑浊、pH 骤变、有颗粒:直接丢弃,不要救。
细胞状态好:
形态均一、轮廓清晰
生长均匀、无局部堆积
出现分化、拉长、多核、空泡多:说明老化 / 状态差,不建议继续实验。
公司正在出售的产品:
抗人IgA杂交瘤细胞;6E9 | 乳酸杆菌PCR检测试剂盒 |
抗人IgG小鼠杂交瘤细胞;2C4 | 乳腺癌耐药基因PCR检测试剂盒 |
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抗CEA小鼠杂交瘤细胞;C2 | 人气管上皮细胞沙门氏菌invA 基因荧光PCR检测试剂盒(探针法) |
抗抗人垂体泌乳杂交瘤细胞;PRL2 | 沙门氏菌invA基因(284bp)常规PCR检测试剂盒 |
冻存复苏:
冻存的梯度降温:
逐步降温:细胞冻存时,先在4℃放置30分钟,再在-20℃放置1小时,随后转移至-80℃冰箱过夜,最后放入液氮长期保存,避免温度骤变导致细胞内冰晶形成。
标记清晰:冻存管上需标记细胞名称、代次、冻存日期和操作者姓名,避免后续复苏时混淆。
复苏的快速操作:
解冻后立即离心:细胞解冻后迅速转移至含预热培养基的离心管中,离心去除含DMSO的冻存液,减少DMSO对细胞的毒性。
复苏后静置培养:复苏后的细胞接种后,24小时内不要换液,让细胞有足够的时间恢复状态,24小时后再更换新鲜培养基。