鸡气管上皮细胞
产品信息:
产品名称 鸡气管上皮细胞
组织来源 气管组织
种属 鸡
产品规格 5×10^5Cells/T25
英文名称 | Chicken Tracheal Epithelial Cells | 规格 | 5×105 |
细胞形态 | 上皮细胞样 | 货号 | P-X2306 |
培养信息:
方法简介:实验室分离的鸡气管上皮细胞采用中性蛋白酶-连酶蛋白酶混合消化法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:实验室分离的鸡气管上皮细胞经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称:鸡气管上皮细胞
组织来源:气管组织
产品规格:5×10⁵Cells/T25培养瓶
培养信息:包被条件鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:上皮细胞样
传代特性:可传1代
消化液:0.25%胰蛋白酶鸡气管上皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞简介 :
鸡气管上皮细胞分离自气管组织;气管(Trachea),呼吸器官的一部分;为后壁略平的圆筒型管状。上端平第六颈椎下缘,与环状软骨相连;向下至第四、五胸椎体(相当胸骨角平面)交界处,分左、右主支气管,分叉处称为气管杈。气管主要由14-16个半环状软骨构成,有弹性,软骨为“C”字形的软骨环,缺口向后,各软骨环以韧带连接起来,环后方缺口处由平滑肌和致密结缔组织连接,保持了持续张开状态。管腔衬以粘膜,表面覆盖纤毛上皮,粘膜分泌的粘液可粘附吸入空气中的灰尘颗粒,纤毛不断向咽部摆动将粘液与灰尘排出,以净化吸入的气体。气管上皮是气道与外界环境接触的第一道防线,不仅是各种病原体、炎症介质作用的靶细胞,还作为效应细胞合成、释放多种炎性介质和细胞因子从而参与气道炎症及免疫反应。体外培养的原代气管上皮细胞因与体内组织在形态结构和功能活动上存在很大的相似性,因此,在基础及临床研究中极为重要。
操作过程:
组织消化的细节:
分阶段消化:对于致密组织(如肾脏、乳腺),可先剪碎至1mm³左右的小块,用PBS清洗2-3次去除血液和杂质,再进行酶消化,避免杂质影响酶的活性。
间歇振荡消化:消化过程中可将培养瓶置于摇床上,以60-80rpm的速度轻微振荡,促进酶与组织充分接触,提高消化效率。
细胞计数与接种:
计数前混匀:细胞悬液需充分混匀后再取样计数,避免细胞沉降导致计数误差;计数时至少计数2个方格,取平均值提高准确性。
接种后静置:细胞接种后将培养瓶置于培养箱内静置2-4小时,期间不要晃动,让细胞自然贴壁,之后再轻轻更换培养位置。
换液与传代的技巧:
换液留底液:换液时不要完全倒掉旧培养基,可保留10%左右的底液,减少细胞环境的突变,帮助细胞适应新培养基。
传代避免过度消化:原代细胞对胰蛋白酶更敏感,传代时消化时间比传代细胞短2-3分钟,镜下观察到细胞边缘收缩、开始脱落时即可终止消化。
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原代细胞实验常见问题:
污染防控:实验全程严格无菌操作,超净工作台使用前紫外消毒30分钟,实验用品需高压灭菌;定期对培养箱、水浴锅等设备进行清洁和消毒,避免细菌、真菌、支原体污染。
细胞老化与分化:原代细胞传代次数有限,通常传至3-5代后会出现老化,需及时冻存早期代次细胞;培养过程中避免过度传代、营养缺乏、环境刺激等因素,防止细胞自发分化。
实验重复性保障:每次实验使用同一来源、同一代次的细胞,严格控制实验条件(如培养基批次、消化时间、培养时间等),设置足够的重复样本,减少实验误差。