大鼠骨骼肌细胞 新品

细胞简介：

大鼠骨骼肌细胞分离自四肢肌肉组织；骨骼肌又称横纹肌，肌肉中的一种，约占全身重量的40%。骨骼肌纤维为长柱形的多核细胞，肌膜的外面有基膜紧密贴附。属于横纹肌，横纹肌还包括心肌与内脏横纹肌，其中骨骼肌主要分布于四肢。每块肌肉都是具有一定形态、结构和功能的器官，有丰富的血管、淋巴分布，在躯体神经支配下收缩或舒张，进行随意运动。肌肉可根据共形状、大小、位置、起止点、纤维方向和作用等命名。依形态命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨状肌等。骨骼肌细胞呈纤维状，不分支，有明显横纹，核很多，且都位于细胞膜下方。肌细胞内有许多沿细胞长轴平行排列的细丝状肌原纤维。每一肌原纤维都有相间排列的明带(Ⅰ带)及暗带(A带)。明带染色较浅，而暗带染色较深。暗带中间有一条较明亮的线称H线。H线的中部有一M线。明带中间，有一条较暗的线称为Z线。两个Z线之间的区段，叫做一个肌节。骨骼肌细胞也称横纹肌细胞，细胞呈纤维状，不分支，有明显横纹，核很多，且都位于细胞膜下方，细胞多呈梭行，具有一定的方向性。骨骼肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态：大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。

产品信息：

方法简介：实验室分离的大鼠骨骼肌细胞采用胶原酶消化法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：实验室分离的大鼠骨骼肌细胞经α-Sarcomeric actin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

产品名称：大鼠骨骼肌细胞

组织来源：骨骼肌组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

培养信息：包被条件PLL(0.1mg/ml)

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性：可传5代左右；3代以内状态最佳

消化液：0.25%胰蛋白酶大鼠骨骼肌细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
原代细胞实验要点：

一、取材与分离

新鲜、无菌：组织离体越快越好，全程冰上操作。

去除杂质：剔除脂肪、结缔组织、血污，减少污染和消化干扰。

温和消化：

控制酶浓度、温度、时间

及时终止消化，避免细胞过度损伤

过筛过滤：去除组织块，获得单细胞悬液。

二、接种与培养

密度关键：原代细胞普遍怕稀，密度太低不贴壁、不长。

完全贴壁后再换液：刚接种别乱动。

专用培养基：

内皮、上皮、平滑肌、神经元等尽量用专用原代培养基

血清质量影响极大，建议批次验证

CO₂、湿度、温度严格稳定，避免频繁开关门。

三、传代与冻存

不要等太满：汇合度 70%–80% 就传，不要等到堆积。

消化监控：镜下观察细胞变圆、间隙变大立即终止。

冻存保护：

标准：90% 血清 + 10% DMSO

程序降温，尽快转入液氮

原代细胞冻存复苏能力弱，尽量早冻、多冻。

四、污染与状态判断

一旦浑浊、pH 骤变、有颗粒：直接丢弃，不要救。

细胞状态好：

形态均一、轮廓清晰

生长均匀、无局部堆积

出现分化、拉长、多核、空泡多：说明老化 / 状态差，不建议继续实验。
实验后处理：

废弃样本处理：

细胞废弃物消毒：实验后的培养基、细胞悬液需用含有效氯的消毒液处理30分钟后再排放，培养瓶、吸管等耗材需高压灭菌后丢弃。

动物组织处理：剩余的动物组织需放入专用的生物危害垃圾袋，由专业机构进行无害化处理，避免生物污染。

实验设备清洁：

超净工作台清洁：实验结束后用75%酒精擦拭台面，打开紫外灯照射30分钟，关闭风机。

培养箱定期清洁：每周用75%酒精擦拭培养箱内壁和隔板，每2周更换一次培养箱内的水盘，避免滋生细菌。

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