猪瘟病毒/口蹄疫病毒通用型（CSFV/FMDV-U）核酸检测试剂盒(双重荧光PCR法) 新品

 产品介绍：

猪瘟病毒/口蹄疫病毒通用型（CSFV/FMDV-U）核酸检测试剂盒(双重荧光PCR法)是一种基于双重实时荧光定量PCR（Duplex qPCR）技术的兽医分子诊断产品。该试剂盒专门用于体外定性检测猪的临床样本中是否存在猪瘟病毒（Classical Swine Fever Virus, CSFV）和口蹄疫病毒通用型（Foot-and-Mouth Disease Virus-Universal, FMDV-U）的特异性核酸。

猪瘟（CSF）和口蹄疫（FMD）均为世界动物卫生组织（WOAH）规定的A类传染病，对养猪业具有毁灭性打击。该试剂盒通过在一个反应体系中同时检测这两种高危病原体，实现了对猪群主要烈性传染病的快速筛查与鉴别，为疫情的早期快速诊断、紧急免疫及防控净化提供了精准、高效的工具。

检测原理：双重荧光定量PCR

该试剂盒的核心原理是利用TaqMan探针法，针对两种病毒的特异性基因序列进行同步扩增和检测：

靶标基因选择：

猪瘟病毒 (CSFV)：针对猪瘟病毒基因组的高度保守区域设计特异性引物和探针（通常位于5'非编码区或NS5B基因区域）。该区域具有极高的特异性，可区分牛病毒性腹泻病毒（BVDV）等黄病毒科近缘病毒。

口蹄疫病毒通用型 (FMDV-U)：针对口蹄疫病毒所有血清型（如O型、A型、Asia1型等）共有的高度保守区域设计引物和探针，通常位于3D聚合酶基因（病毒RNA聚合酶）或5'-UTR区（基因组非编码保守区）。这使得该试剂盒能够广谱检出各种血清型的FMDV。

双重检测机制：

FAM通道：通常用于检测口蹄疫病毒通用型（FMDV-U）。若样本中含有FMDV，FAM荧光信号会随PCR扩增而增强。

HEX/VIC/Cy5通道：通常用于检测猪瘟病毒（CSFV）。若样本中含有CSFV，该通道荧光信号会随PCR扩增而增强。

结果判定：通过分析两个通道的扩增曲线和Ct值，可以判断样本中是单一感染（仅CSFV或仅FMDV）还是混合感染（CSFV和FMDV同时存在）。

内参系统：部分试剂盒会引入内源性内参（如猪源性内参基因），用于监控样本采集质量及PCR反应体系是否存在抑制物，防止假阴性。

核心组分与性能参数

PCR反应预混液：包含Taq DNA聚合酶、逆转录酶（RT）、dNTPs、Mg²⁺缓冲液、UNG酶（防污染）及两组特异性引物探针混合物。

阴阳性对照：

阳性对照：含有CSFV和FMDV目标片段的质粒混合物或灭活病毒液（PTC）。

阴性对照：无核酸酶的水（NTC）。

阳性对照：含有CSFV和FMDV目标片段的质粒混合物或灭活病毒液（PTC）。

关键性能参数：

最低检测限 (LOD)：通常可达 1×10³ copies/mL。

检测范围：通常为 2×10³ ~ 1×10⁸ copies/mL。

特异性：与其他猪常见病原体（如猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒等）无交叉反应。

检测时间：从核酸提取到出结果通常仅需 2-3 小时。

规格：常见规格为 50T/盒。

临床应用与意义

猪群烈性传染病的快速鉴别：当猪群出现发热、水泡、神经症状或繁殖障碍时，快速鉴别是否由猪瘟病毒或口蹄疫病毒引起，指导养殖场采取不同的隔离和处置措施。

混合感染的检测：在临床上，猪瘟和口蹄疫可能存在混合感染或继发感染，该试剂盒能同时检出两种病毒，避免漏诊。

进出口检验检疫：作为国际贸易中猪病检测的依据，符合WOAH（世界动物卫生组织）的检测标准。

疫苗免疫效果评估：通过检测病毒载量变化，评估猪瘟或口蹄疫疫苗的免疫效果及攻毒保护率。

优势与局限性

特性  描述

一管双检  同时检测猪瘟和口蹄疫，节省样本、试剂和检测时间，降低检测成本。

广谱性强  口蹄疫检测部分可覆盖所有血清型，不受病毒血清型变异的影响。

高灵敏度  可检测出极低含量的病毒核酸，优于传统的病毒分离培养法。

高特异性  引物探针针对特异基因设计，不易与其他猪病病原体交叉反应。

局限性  检测结果受样本采集质量（如采血是否抗凝）及核酸提取效率影响大；高度降解的样本可能导致假阴性。

操作与解读注意事项

样本采集：

猪瘟病毒：建议采集抗凝全血（EDTA抗凝）、脾脏、淋巴结或扁桃体组织。发病初期病毒血症期血液检出率最高。

口蹄疫病毒：建议采集水泡液、水泡皮、咽拭子或食道-咽部刮取物（OP液）。

核酸提取：需使用专门的病毒RNA提取试剂盒（如磁珠法），避免基因组DNA污染。

防污染：PCR实验室必须严格分区，使用带滤芯的吸头，防止扩增产物气溶胶污染导致假阳性。

结果判读标准：

阳性：FAM或HEX/VIC通道Ct值 ≤ 35-38（参照说明书），且扩增曲线呈典型的“S”型指数增长。

阴性：FAM和HEX/VIC通道均无扩增曲线，或Ct值 > 38-。

混合感染：FAM和HEX/VIC通道均有明显的扩增曲线，提示样本中同时存在CSFV和FMDV。

公司正在出售的产品：

应用场景与产品选择建议

科研领域：

常规PCR试剂盒。

临床诊断：

探针法qPCR试剂盒（如牛白血病病毒，灵敏度100拷贝/反应）。

现场检测：

恒温扩增试剂盒（如LAMP法，90分钟出结果）