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硫氧还蛋白氧化还原酶(TrxR)测试盒 新品

Thioredoxin Reductase (TrxR) Assay Kit
450 100管 起订
250 25管 起订
上海 更新日期:2026-03-20

上海博湖生物科技有限公司

VIP1年
联系人:博湖生物
电话:57763112拨打
手机:18930344717 拨打
邮箱:3004987436@qq.com

产品详情:

中文名称:
硫氧还蛋白氧化还原酶(TrxR)测试盒
英文名称:
Thioredoxin Reductase (TrxR) Assay Kit
品牌:
博湖
产地:
国产
保存条件:
-20℃保存
纯度规格:
98
产品类别:
生化检测试剂盒 辅酶Ⅱ系列
检测方法:
微量法、可见分光光度法
种属反应性:
说明书
检测类型:
生化检测试剂盒

商品属性

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产品名称

硫氧还蛋白氧化还原酶(TrxR)测试盒

产品货号

BH-961126

规格

100管/96样、50管/48样

产品分类

辅酶Ⅱ系列

测试方法

微量法、可见分光光度法

用途

仅供科研实验

测定意义与原理

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测定意义

硫氧还蛋白氧化还原酶(TrxR)是一种NADPH依赖的包含FAD结构域的二聚体硒酶,属于吡啶核苷酸-二硫化物氧化还原酶家族成员,与硫氧还蛋白以及NADPH共同构成了硫氧还蛋白系统。TrxR与GR活性类似,催化GSSG还原生成GSH,是谷胱甘肽氧化还原循环关键酶之一。

测定原理

TrxR催化NADPH还原DTNB生成TNB和NADP+: NADPH+DTNB→TrxRNADP++TNB+H+NADPH+DTNBTrxRNADP++TNB+H+ TNB在412nm有特征吸收峰,通过测定412nm波长处TNB的增加速率,即可计算TrxR活性。

自备仪器与试剂

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必备仪器

可见分光光度计/酶标仪(412nm检测通道)

低温离心机(≥10000rpm)

可调节移液器(0.5-10μL、10-100μL、100-1000μL)

冰浴匀浆器/超声破碎仪(用于细胞/细菌样本)

必备耗材

1ml玻璃比色皿/96孔板

离心管(1.5mL、10mL)

一次性无菌吸头

自备试剂

蒸馏水/去离子水

生理盐水(用于样本稀释)

液氮(用于样本速冻)

样本前处理方法

动植物组织样本取新鲜组织,用生理盐水冲洗干净,滤纸吸干水分称取0.1g组织,加入1mL试剂一进行冰浴匀浆10000rpm 4℃离心10min,取上清置冰上待测若酶活性过高,可用提取液稀释1-5倍后测定

血清/血浆样本血清样本:血液凝固后3000g 4℃离心10min,取血清上清血浆样本:加入抗凝剂(肝素/EDTA)后3000g 4℃离心10min,取上清样本可直接检测,无需提取处理;活性过高时可用生理盐水稀释

细菌/真菌样本收集对数生长期细胞/细菌,8000g 4℃离心5min弃上清500万细胞加入1mL试剂一,冰浴超声波破碎(功率300w,超声2s,间隔3s,总时间3min)10000rpm 4℃离心10min,取上清置于冰上待测

测定操作步骤

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比色法操作

试剂准备:

试剂一:液体×1瓶,4℃保存

试剂二:液体×1瓶,4℃避光保存

试剂三:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入5ml蒸馏水溶解

预温育:

分光光度计预热30min,调节波长到412nm,用蒸馏水调零

试剂一在25℃(一般物种)或37℃(哺乳动物)预热30min

反应启动:

空白管:取1ml玻璃比色皿,加入100μl试剂二,100μl试剂三,800μl试剂一,迅速混匀后于412nm测定10s和310s吸光度,记为A1和A2。△A空白管=A2-A1

测定管:取1ml玻璃比色皿,加入100μl试剂二,100μl试剂三,700μl试剂一,100μl上清液,迅速混匀后于412nm测定10s和310s吸光度,记为A3和A4。△A测定管=A4-A3

微量法(酶标仪)操作流程96孔板每孔加入:试剂一90μL + 试剂二5μL + 试剂三5μL + 样本2μL37℃预温育5min,加入样本后立即混匀设置动力学模式,412nm处连续读取10个循环(每1min读取1次)计算吸光度增加速率(ΔA/min)

酶活力计算方法

单位定义

U/mL:每mL样本每分钟生成1μmol TNB的酶量

U/mgprot:每mg蛋白每分钟生成1μmol TNB的酶量

U/g鲜重:每g组织鲜重每分钟生成1μmol TNB的酶量

计算公式

TrxR活性(U/mL)=(ΔA测定管−ΔA空白管)×V反总×V样总ε×d×V样测×TTrxR活性(U/mL)=ε×d×V样测×T(ΔA测定管−ΔA空白管)×V反总×V样总

ΔA:1min内吸光度变化值

V反总:反应体系总体积(1.0mL)

V样总:样本提取液总体积(mL)

ε:TNB摩尔消光系数(13.6×10³ L/(mol·cm))

d:比色皿光径(1cm)

V样测:测定时加入样本体积(0.1mL)

T:反应时间(3min)

简化公式

血清(浆)样本:TrxR(U/mL)= 5.14 × (ΔA测定管-ΔA空白管)

组织样本(蛋白浓度):TrxR(U/mgprot)= 5.14 × (ΔA测定管-ΔA空白管) ÷ Cpr

组织样本(鲜重):TrxR(U/g鲜重)= 5.14 × (ΔA测定管-ΔA空白管) ÷ W

注意事项

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样本处理:

样本需新鲜制备,避免酶失活;-80℃可保存1个月

匀浆与超声破碎需在冰浴中进行,控制温度在0-4℃

避免样本接触金属离子,可用EDTA螯合

试剂使用:

试剂二对光敏感,配制后需避光保存

试剂三需现配现用,避免降解

不同批号试剂不能混用,需重新绘制标准曲线

测定过程:

反应温度严格控制在37℃(哺乳动物)或25℃(其他物种)

ΔA值大于0.5,需稀释样本后重新测定,提高检测灵敏度

ΔA值小于0.005,可延长反应时间到5min或10min

质量控制:

每次实验设置空白对照(提取液替代样本)和阳性对照

若结果偏差较大,需检查试剂是否变质、样本处理是否正确

实验前建议选择2-3个预期差异大的样本做预测定

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硫氧还蛋白氧化还原酶;TrxR;测试盒;

公司简介

派瑞曼pyram?是上海博湖生物科技有限公司(Shanghai Bohu Biological Technology Co., Ltd.,China)的产品品牌。 派瑞曼pyram?是一家化学、生化和材料科学等领域的科研用研发产品的制造商和供应商,我们的产品在相当宽的基础科学领域得到广泛的应用。 客户包括学术界、工业界和政府的研究和开发实验室以及制药、生物技术、化工/石化行业等具商业规模的企业。 派瑞曼pyram?除包括化学、分析化学、生命科学、材料科学和病理科学产品。质量是所有产品和服务最关键的组成部分,我们通过质量和实力赢得客户的信赖。产品的质量是企业的生命。 公司秉承"专注品质、诚信为本、服务至上、合作共赢"的企业文化积极参与生物领域的技术创新和技术服务,力求为我国科研事业更好的,更专业的服务!

成立日期 (13年)
注册资本 50.000000万人民币
员工人数 10-50人
年营业额 ¥ 300万-500万
经营模式 贸易
主营行业 生物化工,细胞培养,分子生物学,细胞生物学

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