酯化梭状芽孢杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒

酯化梭状芽孢杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品用途

用于科研领域中对酯化梭状芽孢杆菌（Clostridium estertheticum）的定性及定量检测，基于染料法荧光定量PCR技术，具有高灵敏性和特异性。

产品特点

即开即用：预混优化反应体系，用户仅需提供DNA模板。

高特异性：引物针对酯化梭状芽孢杆菌高度保守序列设计，避免与其他微生物交叉反应。

高灵敏度：检测限低至10^2拷贝/μL，线性范围覆盖5个数量级（10^2–10^7拷贝/μL）。

内置对照：提供无传染性的DNA片段作为阳性对照，排除假阴性干扰。

环保设计：一管式闭管操作，减少气溶胶污染风险。

适用性广：支持绝对定量（标准曲线法）和相对定量分析。

技术参数

反应体系：20 μL/次，50次/盒。

检测通道：兼容FAM/SYBR Green等染料通道。

保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月；运输需低温（冰袋或干冰）。

适用仪器：主流荧光定量PCR仪（如ABI 7500、Bio-Rad CFX等）。

操作流程

标准品稀释（定量检测需执行）：

按10倍梯度稀释阳性对照DNA（建议6个浓度：10^2–10^7拷贝/μL），独立操作避免污染。

加样：

依次加入模板DNA、预混试剂、引物探针混合液至PCR管。

PCR程序：

预变性：95℃ 2分钟；

循环阶段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（采集荧光信号）。

数据分析：

定性：Ct值≤35判为阳性；

定量：通过标准曲线计算模板拷贝数。

注意事项

仅限科研：不可用于临床诊断或环境监测。

防污染措施：分区操作（试剂准备区、样本处理区、扩增区），使用无核酸酶耗材。

质量控制：每批次实验需包含阴性对照（无模板对照，NTC）。

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