破伤风梭状芽孢杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

破伤风梭状芽孢杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品特点

即开即用：用户仅需提供待测DNA模板，操作便捷。

高特异性：引物针对破伤风梭状芽孢杆菌保守序列设计，与其他病原体无交叉反应。

高灵敏度：检测下限可达数百拷贝/反应。

闭管检测：一管式荧光定量PCR设计，避免扩增产物污染。

稳定可靠：含阳性对照（1×10⁸ 拷贝/μL），便于结果验证。

规格及成分

| 成分 | 包装规格 | 备注 |

| 2×qPCR MagicMix | 500μL（棕色管） | 预混PCR反应液 |

| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL（黄盖） | 用于标准品稀释 |

| PCR引物混合物 | 100μL（白盖） | 特异性引物及探针 |

| PCR阳性对照 | 50μL（红盖） | 1×10⁸ 拷贝/μL |

| 使用手册 | 1份 | 详细操作步骤及注意事项 |

运输与保存

运输条件：低温运输（冰袋或干冰）。

保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。

自备试剂

DNA模板（待测样品）。

10×ROX荧光校正染料（仅限ABI 7500/7700/7900机型需使用）。

使用方法

阳性对照稀释（6个梯度制备）

标记离心管：编号为2-7号，分别对应10²-10⁷拷贝/μL梯度。

稀释步骤：

7号管加入45μL稀释液及5μL阳性对照（原液），震荡混匀，得10⁷拷贝/μL。

依次转移5μL至下一管，重复稀释至2号管（10²拷贝/μL）。

注意事项：

使用带滤芯枪头，防止气溶胶污染。

稀释操作需在独立区域进行，避免交叉污染。

荧光定量PCR反应（20μL体系）

反应体系配制：

| 组分 | 体积（μL） |

| 2×qPCR MagicMix | 10 |

| 引物混合物 | 2 |

| 模板DNA/阳性对照 | 5 |

| ROX（若需） | 0.4 |

| ddH₂O | 补至20 |

PCR程序推荐：

预变性：95℃ 3分钟。

循环：95℃ 15秒 → 60℃ 60秒（40循环）。

荧光信号采集：60℃延伸阶段。

数据分析：

以阳性对照Ct值为纵轴、浓度对数为横轴绘制标准曲线，计算待测样本拷贝数。

注意事项

本试剂盒阳性对照为DNA片段，不含活菌，无生物安全风险。

实验分区操作（试剂准备区、样本处理区、扩增区），避免污染。

不同仪器需优化循环参数，具体参考设备说明书。

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