大鼠白细胞介素2(IL-2)ELISA试剂盒 新品

产品介绍：

大鼠白细胞介素2（IL-2）ELISA试剂盒是一种用于定量检测大鼠血清、血浆、细胞培养上清液及其他生物样本中IL-2蛋白含量的高灵敏度试剂盒，广泛应用于免疫学、肿瘤学及临床前研究等领域。该试剂盒采用双抗体夹心ELISA法，通过预包被抗大鼠IL-2抗体的微孔板，依次加入样本或标准品、生物素标记的检测抗体和HRP标记的链霉亲和素，形成免疫复合物。加入TMB显色底物后，颜色深浅与样本中IL-2浓度成正相关，450nm波长下测定OD值，通过标准曲线计算浓度。

主要特点

检测范围宽：通常为15.625-1000pg/mL至31.25-2000pg/mL，灵敏度高（最低检出量可达18.75pg/mL）。

高特异性：与其它细胞因子无明显交叉反应，确保检测准确性。

重复性好：板内、板间变异系数均小于10%，结果稳定可靠。

应用广泛：适用于大鼠IL-2在免疫应答、肿瘤治疗、自身免疫疾病、器官移植等研究中的表达水平检测。

操作简要流程

样本准备：血清、血浆或细胞培养上清等样本适当处理并稀释。

加样：将样本和标准品加入预包被抗体的微孔板，每孔100μL，设空白对照。

温育：37℃孵育30-90分钟。

洗板：弃去液体，洗涤5次，拍干。

加检测抗体：加入生物素化抗大鼠IL-2抗体，37℃孵育30-60分钟。

洗板：同上。

加酶结合物：加入HRP标记的链霉亲和素，37℃孵育30分钟。

显色与终止：加入TMB显色液，37℃避光显色10-30分钟；加终止液。

读数：450nm测定OD值，依据标准曲线计算IL-2浓度。

注意事项

样本避免反复冻融，不可检测含的样品。

试剂盒组分如洗涤液、标准品、抗体等需按说明书规范使用和保存。

严格遵守操作步骤及仪器校准，确保结果准确

ELISA试剂盒的主要优点缺点

维度  优势 (Pros) 劣势 (Cons)

检测性能   灵敏度极高，特异性强，结果准确  可能存在交叉反应，易受干扰物影响

操作体验   流程标准化，无需昂贵设备，适合高通量检测   步骤多且繁琐，耗时较长，对操作技巧有要求

经济成本   适合大批量样本检测，长期看性价比尚可   单次试剂成本较高，且不同批次可能存在差异

应用范围   可检测血清、血浆、细胞上清等多种样本   对样本质量（如是否溶血）敏感

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温度平衡（最容易被忽视的点）

 操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。

后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。

试剂配制

洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。

现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。

样本处理

避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。

离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。

稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。