大鼠组织因子(TF)ELISA试剂盒 新品

产品介绍：

大鼠组织因子(TF)ELISA试剂盒是一种用于体外定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中组织因子(TF)含量的科研试剂盒。该试剂盒通常采用双抗体夹心ELISA法，具有高特异性和灵敏度，广泛应用于凝血功能、炎症反应等领域的研究。

核心特点

检测原理：采用双抗体夹心法。用抗大鼠TF抗体包被酶标板，样本中的TF与包被抗体结合，再依次加入生物素化抗大鼠TF抗体和HRP标记的亲和素，形成免疫复合物。通过TMB显色，OD值与TF浓度呈正相关，依据标准曲线计算样品浓度。

检测范围与灵敏度：不同品牌试剂盒检测范围略有差异，常见为7.5-240 pg/mL或31.25-2000 pg/mL，灵敏度可达1.0 pg/mL以下。

样本类型：适用于血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清等生物液体样本。血清和血浆样本需常规离心收集，组织样本需制成匀浆并离心取上清，细胞样本可直接取上清或经冻融、超声破碎后检测。

试剂盒保存：未开封试剂盒需保存于2-8℃，避免反复冻融。开封后未用完的板条应密封保存于2-8℃，并在有效期内使用。

操作流程（简要）

样本和标准品加样：将标准品和待测样本加入预包被抗体的微孔板。

温育与洗涤：37℃温育一定时间后，洗板5次去除未结合物质。

加检测抗体和酶结合物：加入生物素化抗体及HRP-亲和素，温育并洗涤。

显色与终止：加入TMB显色液，37℃避光显色，最后加入终止液。

读数与计算：酶标仪450nm测定OD值，根据标准曲线计算TF浓度。

注意事项

严格避免样本溶血和脂血，避免防腐剂，因其会影响HRP活性。

各步加样需准确，推荐使用排枪和校准加样器。

洗板要彻底，避免交叉污染。

显色液和终止液需避光保存，反应后及时测定OD值。

所有试剂和样本处理需按说明书规范操作，确保结果准确。

ELISA试剂盒的主要优点缺点

维度  优势 (Pros) 劣势 (Cons)

检测性能   灵敏度极高，特异性强，结果准确  可能存在交叉反应，易受干扰物影响

操作体验   流程标准化，无需昂贵设备，适合高通量检测   步骤多且繁琐，耗时较长，对操作技巧有要求

经济成本   适合大批量样本检测，长期看性价比尚可   单次试剂成本较高，且不同批次可能存在差异

应用范围   可检测血清、血浆、细胞上清等多种样本   对样本质量（如是否溶血）敏感

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温度平衡（最容易被忽视的点）

 操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。

后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。

试剂配制

洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。

现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。

样本处理

避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。

离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。

稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。