大鼠组织因子(TF)ELISA试剂盒

预期用途

本试剂盒采用酶联免疫吸附法（ELISA）定量检测大鼠血浆或其他生物液体中的组织因子（TF）含量，适用于体外研究，不可用于临床诊断。

实验原理

采用双抗体夹心法：

微孔板预包被抗大鼠TF抗体，捕获样本或标准品中的TF。

依次加入生物素化抗大鼠TF抗体、辣根过氧化物酶（HRP）标记的亲和素，形成复合物。

洗涤后加入TMB显色，在HRP催化下产生蓝色产物，终止液（酸）作用后转为黄色。

450 nm波长下测定吸光度（OD值），TF浓度与OD值呈正比，通过标准曲线计算样本浓度。

试剂盒组成

核心组分：

预包被酶标板（96孔）

冻干标准品（2瓶，初始浓度4,000 pg/mL，需稀释至系列梯度：1,000、500、250、125、62.5、31.25、15.6 pg/mL）

生物素化抗体、HRP-亲和素、TMB显色液、终止液

20×浓缩洗涤液（需稀释为1×工作液）

样本稀释液、封板膜、密封袋

未提供耗材：

酶标仪（450 nm）、移液器及吸头、蒸馏水、37℃恒温箱、吸水纸。

操作步骤

复温与准备：试剂盒室温平衡30分钟，配制1×洗涤液。

标准品稀释：按说明书梯度稀释，避免孔内直接稀释。

加样：

标准品孔：50 μL/孔。

样本孔：10 μL样本 + 40 μL稀释液（5倍稀释）。

空白孔：仅加稀释液。

孵育与洗涤：37℃反应后彻底洗涤。

显色与终止：加入TMB避光显色15分钟，终止后30分钟内检测OD值。

技术参数

检测范围：15.6/31.25–2,000 pg/mL。

灵敏度：≤18.75 pg/mL。

精密度：批内变异系数（CV）<10%，批间CV<15%。

注意事项

避免反复冻融标准品或样本。

显色时间需严格控制，终止后颜色稳定性有限。

不同批次试剂不可混用。

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