大鼠铜蓝蛋白(CP)ELISA试剂盒 新品

产品介绍：

大鼠铜蓝蛋白(CP)ELISA试剂盒是一种用于体外定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清及其他生物体液中铜蓝蛋白(CP)含量的科研工具。

检测原理

试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗大鼠CP抗体包被于酶标板上，加入样品（或标准品）和辣根过氧化物酶标记的抗大鼠CP抗体，形成双抗体夹心的免疫复合物。经过洗涤后，加入显色底物TMB，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加入终止液后变成黄色。颜色的深浅与样本中CP浓度呈正比，通过酶标仪在450nm波长处测OD值，绘制标准曲线计算样品中CP的浓度。

主要参数

检测范围：根据不同品牌和产品有所差异，如6.25-400ng/ml或1.25-40ng/ml。

灵敏度：最低检测浓度小于1.0 pg/mL至3.75ng/ml不等。

特异性：可特异性检测大鼠CP，与其他类似物无明显交叉反应。

重复性：板内和板间变异系数均小于10%至15%。

保存条件：2-8℃保存，有效期6个月。

样本处理及要求

血清：室温凝固2小时或4℃过夜，离心取上清。

血浆：用EDTA或肝素抗凝，离心取上清。

组织匀浆：用预冷PBS冲洗组织，称重后剪碎并研磨，离心取上清。

细胞上清液：离心去除颗粒，取上清。

保存：样本如不立即检测，应分装后-20℃冷冻保存，避免反复冻融。

试剂盒组成

预包被抗体的酶标板

标准品

辣根过氧化物酶标记的检测抗体

洗涤液

显色底物TMB

终止液

样品稀释液

密封袋等

操作步骤

从冷藏环境中取出试剂盒，平衡至室温。

设置标准品孔和样本孔，加入相应试剂。

37℃温育一定时间，洗涤酶标板。

加入检测抗体，再次温育并洗涤。

加入显色底物，避光反应。

加入终止液，酶标仪450nm测定OD值。

绘制标准曲线，计算样本浓度。

注意事项

严格遵守说明书操作，避免试剂和样本的交叉污染。

洗板要彻底，避免干燥。

标本避免溶血和反复冻融。

所有试剂和样本需平衡至室温后再使用。

ELISA试剂盒的主要优点

ELISA之所以被广泛应用，主要归功于以下几个核心优势：

灵敏度高（抓得准）：

它利用酶的催化放大作用，能将微弱的信号放大，因此可以检测到样本中极低浓度的目标物质（甚至达到皮克级 pg/mL）。哪怕样本里只有微量的病毒、激素或蛋白质，它也能“捕捉”到。

特异性强（瞄得准）：

基于抗原-抗体的特异性结合原理，试剂盒中的抗体通常只与目标物质反应，很少受样本中其他杂质的干扰。这大大降低了假阳性率，结果准确可靠。

操作简便且快速：

相比于一些复杂的仪器分析方法，ELISA的操作流程相对标准化。市面上的试剂盒通常是一套完整的组件，按照说明书进行加样、孵育、洗板、显色即可。整个过程通常在几小时内就能完成。

高通量与适用性广：

它通常采用96孔板或48孔板，一次实验可以同时处理几十个样本，非常适合大规模的流行病学筛查或批量科研实验。此外，它不仅能测蛋白，还能测抗体、激素、药物残留甚至农药，应用领域覆盖了医学、食品安全和环境监测。

安全稳定：

不像放射免疫法那样使用放射性同位素，ELISA使用的是酶标记，对人体和环境无辐射危害，且试剂保存时间较长。

公司正在出售的产品：

温度平衡（最容易被忽视的点）

 操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。

后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。

试剂配制

洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。

现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。

样本处理

避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。

离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。

稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。