大鼠铜蓝蛋白(CP)elisa试剂盒

一、核心检测信息

检测目标

特异性定量大鼠血清、肝组织匀浆或脑脊液中的 铜蓝蛋白（CP），一种由肝脏合成的含铜糖蛋白，通过亚铁氧化酶活性调控铁代谢、清除自由基，在威尔逊病、神经退行性疾病及慢性炎症中起关键作用。

检测原理

双抗体夹心ELISA：

预包被抗大鼠CP单抗（靶向铜结合区）捕获目标蛋白 → 生物素标记二抗（识别第六结构域）结合 → 超敏AP-TMB显色系统（405nm/620nm双波长）。

可选酶活性检测：通过监测515nm处邻联大茴香胺（ODA）氧化速率验证功能性CP。

 二、技术参数与验证

关键指标  技术说明

检测范围  10-500 μg/mL（覆盖生理至病理浓度）

最低检测限  3 μg/mL（可检测铜代谢异常早期阶段）

样本兼容性  血清（避免溶血）、肝组织裂解液（含1% CHAPS）、脑脊液（需浓缩5倍）

铜离子依赖性  试剂盒含0.1mM CuCl维持蛋白稳定性

种属特异性  与大鼠HEPH（膜铁转运蛋白）无交叉

三、典型应用场景

铜代谢疾病

LEC大鼠（威尔逊病模型）血清CP缺失与肝铜蓄积的动态监测

神经退行研究

帕金森病模型黑质区CP活性下降与铁沉积的相关性

氧化应激评估

酒精性肝病中CP抗氧化功能与MDA水平的负向关联

四、操作关键要点

样本处理

肝组织：需用含10mM组氨酸的裂解液（pH7.0）防止铜离子流失

血清样本：采集后避光保存（避免光氧化导致假性低值）

实验优化

高浓度样本需1:10稀释（使用含0.1% BSA的TBS缓冲液）

每板设置内标（健康大鼠混合血清）和铜刺激对照（100μM CuSO处理肝细胞上清）

五、注意事项

干扰因素

高浓度维生素C（＞50mg/dL）会还原铜离子导致假阴性

数据解读

建议联合检测血清游离铜和尿铜以全面评估铜代谢状态

样本保存

分离血清-80℃分装（冻融≤2次），长期储存需添加50%甘油

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