大鼠嗜铬粒蛋白A(CHGA)ELISA试剂盒 新品

大鼠嗜铬粒蛋白A(CHGA)ELISA试剂盒

产品简介:

大鼠嗜铬粒蛋白A(CHGA)ELISA试剂盒是一种用于定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清及其他生物体液中嗜铬粒蛋白A(CHGA)含量的科研工具，采用双抗体夹心法ELISA原理。

检测原理

预先将抗大鼠CHGA抗体包被在酶标板上；

加入待测样本或标准品，样本中的CHGA与包被抗体结合；

加入生物素标记的抗大鼠CHGA抗体，形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物；

洗涤后加入HRP（辣根过氧化物酶）标记的亲和素，生物素与亲和素特异性结合；

加入显色底物TMB，HRP催化TMB显色，颜色深浅与CHGA浓度正相关；

在450 nm波长下测定吸光度，通过标准曲线计算样本中CHGA的浓度。

2. 主要性能参数

检测范围：通常为31.25-2000 pg/mL，不同品牌有所差异

灵敏度：最低检测限可达12.3-18.75 pg/mL

特异性：仅针对大鼠CHGA，与其他类似物无明显交叉反应

精密度：板内和板间变异系数一般<10%～12%

样本类型：血清、血浆（EDTA/肝素抗凝）、组织匀浆、细胞上清、尿液等

保存条件：2-8℃冷藏保存，避免反复冻融，试剂盒有效期约6个月

3. 操作步骤（简要）

从冷藏环境中取出试剂盒，平衡至室温；

设置标准品孔和样本孔，加入相应试剂；

37℃温育1～2小时，使抗原抗体充分结合；

洗涤酶标板3～5次，去除未结合物质；

加入酶标检测抗体，37℃再温育1小时；

洗涤后加TMB显色，室温或37℃避光反应10-15分钟；

加终止液，使颜色稳定，酶标仪450 nm读数；

绘制标准曲线，计算样本浓度。

4. 注意事项

避免样本溶血和反复冻融，样本如不能立即检测可分装-20℃保存；

不同批次试剂盒组分不可混用，所有试剂使用前需摇匀；

试剂盒仅供科研使用，不用于临床诊断；

洗板过程需彻底，避免板内污染或干燥；

显色底物TMB需避光保存，使用前30分钟配制。

应用与服务

该试剂盒广泛应用于生物医学研究领域，如机制研究、疾病标志物检测等。部分厂家提供免费代测服务和专业技术支持，方便用户获得准确可靠的实验结果。

操作要点：

需严格遵守试剂盒说明书操作，建议做复孔及标准曲线。

洗涤过程至关重要，洗涤不充分会影响结果准确性。

所有试剂使用前需恢复至室温，避免批号混用。

如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：

稀释线性实验 (Linearity)：

操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。

预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。

干扰实验 (Interference Test)：

操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。

预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。

回收实验 (Recovery Test)：

操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。

预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。

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注意事项

试剂盒组分应按说明储存，使用前平衡至室温。

实验中需避免交叉污染，建议使用一次性吸头。

充分混匀对实验结果至关重要。

试剂盒仅供研究使用，不可用于临床诊断。

显色液需避光保存，终止液为2M硫酸，操作时需安全防护。