大鼠嗜铬蛋白A(CHGA)ELISA试剂盒

产品概述

本试剂盒用于定量检测大鼠血清、血浆或其他生物液体中的嗜铬蛋白A（CHGA）浓度。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），检测范围为31.25-2000 pg/mL，灵敏度为12.3 pg/mL。适用于科研用途，有效期12个月。

试剂盒组成

预包被酶标板（96T或48T）

系列浓度标准品

辣根过氧化物酶（HRP）标记检测抗体

底物A、底物B

终止液

浓缩洗涤液（需稀释后使用）

封板膜

说明书

操作步骤

样本与试剂准备

试剂盒从4℃取出后室温平衡60分钟，未使用的板条需密封保存于4℃。

浓洗涤液若有结晶，37℃水浴溶解后稀释使用。

加样与孵育

标准品孔：加入不同浓度标准品50μL。

样本孔：加入待测样本50μL（若OD值超出标准曲线范围，需用稀释液预稀释）。

空白孔：不加样。

每孔加入HRP标记检测抗体100μL，封板后37℃孵育60分钟。

洗涤

弃去孔内液体，每孔加满洗涤液（350μL），静置1分钟后甩干，重复5次。

显色与终止

每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15分钟。

加入终止液50μL，反应液由蓝变黄。

检测

终止后15分钟内，用酶标仪在450nm波长测定OD值。

结果计算

以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标，绘制标准曲线（建议使用四参数拟合或线性回归）。

根据样本OD值代入曲线方程计算浓度，若样本经过稀释，需乘以稀释倍数。

注意事项

样本处理：避免反复冻融；高脂血症样本需离心去除沉淀。

操作规范：

加样需精准，建议使用校准后的移液器或排枪。

每批次实验需同步制作标准曲线，推荐复孔检测。

安全防护：潜在生物危害样本需按生物安全二级标准处理。

存储条件：未开封试剂盒保存于4℃，开封后板条需密封防潮。

性能参数

精密度：板内变异系数＜10%，板间变异系数＜15%。

特异性：不与大鼠其他嗜铬蛋白家族成员交叉反应。

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