人真皮成纤维细胞 新品

人真皮成纤维细胞

产品信息：

英文名称：Human Dermal Fibroblast Cells

组织来源：皮肤组织

默认种属 人

产品规格 5×10^5Cells/T25

方法简介 公司实验室分离的人真皮成纤维采用先消化、后-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测  公司实验室分离的人真皮成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

细胞简介：

人真皮成纤维分离自真皮组织；真皮，位于表皮深层，向下与皮下组织相连，真皮结缔组织的胶原纤维和弹性纤维互相交织在一起，埋于基质内。其内分布着各种结缔组织细胞和大量的胶原纤维弹性纤维，使皮肤既有弹性，又有韧性。其由两层组成——乳头层与网状层。真皮的结构组成是胶原蛋白、弹性纤维以及基质。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的真皮成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。真皮成纤维细胞在生理条件下的主要功能包括：构造和维持组织的正常形态，合成和释放细胞外基质以及组织损伤后及时大量聚集修复损伤组织。

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

细胞培养操作：

消化培养法

此方法利用酶（如胰蛋白酶、胶原酶）将组织分散成单个细胞或细胞团，形成细胞悬液进行培养，细胞生长较快。

取材与剪切

同样在无菌条件下获取组织，并用Hanks液清洗干净。

将组织剪切成更小的碎块（约 1 mm³），以便酶更好地发挥作用。

酶消化

将组织块转移至容器中，加入适量的酶消化液（如0.25%胰蛋白酶）。

在 37℃ 条件下消化 20-40分钟，期间可适当摇动或吹打。消化程度需在显微镜下观察，当组织分散成细胞团或单个细胞时，立即终止消化。

终止与洗涤

加入含血清的培养液以终止酶的消化作用（血清可抑制胰蛋白酶活性）。

将细胞悬液通过筛网过滤，除去未消化的组织块。然后以 1000 rpm 离心 5-10分钟，弃去上清液。

接种与培养

用适量新鲜培养液重悬细胞沉淀，进行细胞计数，并调整细胞密度至实验所需浓度（例如 5×10⁵ cells/mL）。

将细胞悬液分装至培养瓶中，放入 37℃、5% CO₂ 培养箱中静置培养。

公司正在出售的产品：

代数控制：尽量在低代数（如P3-P10）进行实验，以防止因传代过多导致的遗传漂移或功能衰退。

操作轻柔：原代细胞对环境变化敏感，解冻和传代时需格外小心，避免机械损伤。

营养需求：它们往往需要更复杂的营养成分（如特定的生长因子、血清），普通的培养基可能无法满足其生长需求。