大鼠结肠粘膜上皮细胞 新品

产品定义：

大鼠结肠粘膜上皮细胞是覆盖在大鼠结肠内表面的上皮细胞，主要为柱状上皮细胞，含有大量杯状细胞。它可吸收结肠内的水分和电解质，参与粪便的形成，同时杯状细胞可分泌黏液，润滑肠道并保护结肠粘膜，是研究结肠炎症、溃疡性结肠炎、结肠癌及肠道吸收功能障碍的重要细胞模型。

产品简介：

细胞详述

结肠在右髂窝内续于盲肠，在第 3骶椎平面连接直肠。结肠分升结肠、横结肠、降结肠和乙状结肠4部，大部分固定于腹后壁，结肠的排列酷似英文字母M，将小肠包围在内。结肠横切面由内到外依次为：粘膜（上皮层，固有层，粘膜肌层），粘膜下层，肌层，外膜。结肠黏膜上皮在环境或遗传等多种致癌因素作用下导致结肠癌，是常见的恶性肿瘤之一。因此，体外培养结肠黏膜上皮细胞为研究进一步结肠癌等ji病提供了前提和基础。

细胞特性

1)组织来源于实验动物的正常结肠组织。

2)细胞鉴定：细胞角蛋白-18（CK-18）免疫荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

5)细胞生长方式：铺路石状细胞，不规则细胞，贴壁培养。

推荐培养基：

我们推荐使用 Delf 原代上皮 细胞 培养体系 作为体外培养的培养基。
操作过程：

组织消化的细节：

分阶段消化：对于致密组织（如肾脏、乳腺），可先剪碎至1mm³左右的小块，用PBS清洗2-3次去除血液和杂质，再进行酶消化，避免杂质影响酶的活性。

间歇振荡消化：消化过程中可将培养瓶置于摇床上，以60-80rpm的速度轻微振荡，促进酶与组织充分接触，提高消化效率。

细胞计数与接种：

计数前混匀：细胞悬液需充分混匀后再取样计数，避免细胞沉降导致计数误差；计数时至少计数2个方格，取平均值提高准确性。

接种后静置：细胞接种后将培养瓶置于培养箱内静置2-4小时，期间不要晃动，让细胞自然贴壁，之后再轻轻更换培养位置。

换液与传代的技巧：

换液留底液：换液时不要完全倒掉旧培养基，可保留10%左右的底液，减少细胞环境的突变，帮助细胞适应新培养基。

传代避免过度消化：原代细胞对胰蛋白酶更敏感，传代时消化时间比传代细胞短2-3分钟，镜下观察到细胞边缘收缩、开始脱落时即可终止消化。
原代细胞实验常见问题：

污染防控：实验全程严格无菌操作，超净工作台使用前紫外消毒30分钟，实验用品需高压灭菌；定期对培养箱、水浴锅等设备进行清洁和消毒，避免细菌、真菌、支原体污染。

细胞老化与分化：原代细胞传代次数有限，通常传至3-5代后会出现老化，需及时冻存早期代次细胞；培养过程中避免过度传代、营养缺乏、环境刺激等因素，防止细胞自发分化。

实验重复性保障：每次实验使用同一来源、同一代次的细胞，严格控制实验条件（如培养基批次、消化时间、培养时间等），设置足够的重复样本，减少实验误差。

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