大鼠纤维环细胞

大鼠纤维环细胞

产品信息：

产品名称 大鼠纤维环细胞

组织来源 正常椎间盘组织
种属 大鼠

产品规格 5×10^5Cells/T25

细胞简介：

细胞详述

纤维环，位于椎间盘的周缘部，由纤维软骨组成，纤维环的纤维在椎体间斜行，在横切面上排列成同心环状，相邻环的纤维具有相反的斜度，而相互交叉。纤维环细胞位于胶原纤维束之前，合成和分泌纤维环细胞外基质，维持正常的纤维环结构和功能。

细胞特性

1)组织来源于实验动物的正常椎间盘组织。

2)细胞鉴定：Ⅱ型胶原(Collagen Ⅱ)或Ⅰ型胶原(Collagen Ⅰ)免疫荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

5)细胞生长方式：多角形细胞，不规则细胞，贴壁培养。

推荐培养基：

我们推荐使用 Delf 原代软骨 细胞 培养体系 作为体外培养的培养基。
产品定义：

大鼠纤维环细胞是存在于大鼠椎间盘纤维环中的软骨样细胞，呈扁平状或梭形。它可合成和分泌胶原蛋白、蛋白多糖等细胞外基质，维持纤维环的结构和力学性能，限制髓核的突出，在脊柱的运动和压力缓冲中发挥重要作用，是研究椎间盘退变、腰椎间盘突出症及椎间盘组织工程的重要细胞模型。
原代细胞分离：

组织样本处理：取材后立即置于预冷的含抗生素的PBS或组织保存液中，避免样本干燥和温度变化；修剪时去除坏死、结缔组织等杂质，尽量减小组织块体积以提高消化效率。

消化方法选择：

酶消化法：根据组织类型选对应酶（如胰蛋白酶用于上皮类组织、胶原酶用于结缔组织丰富的组织），严格控制消化温度（通常37℃）和时间，每隔5-10分钟镜下观察，避免过度消化损伤细胞。

机械分离法：适合柔软组织（如脑、肝脏），通过剪碎、吹打、过滤等方式分散细胞，操作时动作轻柔，减少细胞机械损伤。

细胞过滤与离心：用合适孔径的细胞筛（如100-200目）过滤细胞悬液，去除未消化的组织块；离心转速通常为1000-1500rpm，时间5-10分钟，避免高速离心导致细胞破裂。
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细胞消化与传代：

方法一：利多卡因消化法

吸出培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞1次

添加1ml 12mM利多卡因消化液，轻轻转动培养瓶使液体覆盖瓶底，37℃温浴3-5分钟

显微镜下观察到细胞回缩变圆后，加入5ml完全培养基稀释消化液

轻轻吹打混匀细胞，1200rpm离心5分钟，弃上清后用完全培养基重悬接种

方法二：胰酶消化法

若利多卡因消化效果不佳，可更换为0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液，重复上述操作，消化时间控制在1-2分钟

方法三：细胞刮取法

若细胞仍无法消化，加入3ml完全培养基终止消化，用无菌细胞刮轻轻刮取细胞（此方法易造成细胞机械损伤，不推荐）