小鼠卵泡膜细胞
产品信息:
产品名称 小鼠卵泡膜细胞
组织来源 卵巢组织
种属 小鼠
产品规格 5×10^5Cells/T25
英文名称 | Mouse Follicle Membrane Cells | 规格 | 5×105 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 | 货号 | P-X1884 |
培养信息:
方法简介:实验室分离的小鼠卵泡膜细胞采用先机械分离后胶原酶消化结合Percoll密度梯度离心法、并通过专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:实验室分离的小鼠卵泡膜细胞经3β-HSD免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称:小鼠卵泡膜细胞
组织来源:卵巢组织
产品规格:5×10⁵Cells/T25培养瓶
培养信息:包被条件
培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:成纤维细胞样
传代特性:可传3代左右
消化液:0.25%胰蛋白酶小鼠卵泡膜细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞简介 :
小鼠卵泡膜细胞分离自卵巢组织;卵巢是雌性动物的生殖器官,卵巢的功能是产生卵以及类固醇激素。卵巢的位置与睾丸相同,仅左侧发育(右侧已退化),呈葡萄状,均为处于不同发育时期的卵泡,卵泡呈黄色,卵巢表面密布血管。卵巢的大小与年龄和产卵期有关。大多数脊椎动物有两个卵巢,但是部分鱼类的两个卵巢融合为单个结构,而所有鸟类只有左侧卵巢有机能。卵巢是位于子宫两侧的一对卵圆形的生殖器官,它的外表有一层上皮组织,其下方有薄层的结缔组织。卵巢的内部结构可分为皮质和髓质。皮质位于卵巢的周围部分,主要由卵泡和结缔组织构成;髓质位于中央,由疏松结缔组织构成,其中有许多血管、淋巴管和神经。哺乳动物的卵巢内卵泡的发育需要相关激素的调节才能完成,垂体促性腺激素(卵泡刺激素和黄体生成素)使原始卵泡开始发育,其过程中还产生大量的雌激素。雌激素是卵巢的颗粒细胞和卵泡膜细胞在垂体促性腺激素的作用下协同合成的,卵泡膜细胞合成的雄激素透过基膜进入颗粒细胞,并转变为雌激素。因此,卵泡膜细胞在生殖内分泌调节中占有关键的位置,了解其在病理及生理中的作用,对于与性激素有关的妇产科疾病(如多囊卵巢综合症、卵巢癌等)的研究有着重要意义。在哺乳动物卵泡生长发育的过程中,卵母细胞由不断增加的颗粒细胞层包裹。卵巢组织中的膜细胞作为卵泡的外层细胞可以维持卵泡结构的完整性,参与构成卵母细胞和颗粒细胞发育的微环境且为类固醇激素的生成提供底物。在哺乳动物中调节膜细胞类固醇激素生成的机制已见相关报道,但是有关卵泡膜细胞的聚集、生长和分化的研究尚不深入。
原代细胞分离:
组织取材
无菌操作是底线:取材前对动物/组织进行严格消毒,全程在超净台内操作,所有工具提前灭菌
新鲜度决定活性:取材后立即放入预冷的含双抗的PBS中,30分钟内完成分离,若无法即时处理,可暂存于4℃冰箱(不超过24小时)
精准取材:避开血管、脂肪、结缔组织等非目标组织,比如分离肝细胞时要剔除胆囊,分离神经细胞时要去除脑膜
组织处理
机械法:通过剪碎、研磨、过滤等方式分散组织,适用于结缔组织较少的组织(如肝脏、肾脏),注意力度适中,避免过度研磨损伤细胞
酶解法:根据组织类型选择合适的酶:
胰蛋白酶:适用于消化上皮组织、肝、肾等,浓度0.25%-0.5%,消化时间15-30分钟,37℃
胶原酶:适用于消化结缔组织、脂肪组织、肌肉组织等,浓度0.1%-0.3%,消化时间1-4小时,37℃,可加入EDTA增强效果
透明质酸酶:常与胶原酶联用,消化软骨、滑膜等富含透明质酸的组织
联合法:机械剪碎后再进行酶解,兼顾效率与细胞活性
细胞筛选与纯化
过滤:使用200-400目细胞筛过滤细胞悬液,去除未消化的组织块
离心:800-1200RPM离心5-8分钟,弃上清后用PBS重洗2-3次,去除细胞碎片和酶液
特异性纯化:使用差速贴壁法(利用不同细胞贴壁速度差异)、密度梯度离心法(如Percoll、Ficoll)、免疫磁珠分选或流式细胞术,获得高纯度目标细胞
公司正在出售的产品:
猪小肠上皮细胞 | 埃博拉病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 |
转化人肝上皮细胞 | 南非诺卡菌染料法荧光定量PCR试剂盒 |
大鼠肾足细胞 | 豚鼠耳炎诺卡菌染料法荧光定量PCR试剂盒 |
小鼠颅顶前骨细胞亚克隆 14 | 肉色诺卡菌染料法荧光定量PCR试剂盒 |
小鼠骨髓纤维原细胞 | 同狷羚疱疹病毒1型牛羚关联恶性卡他热病毒PCR检测试剂盒 |
小鼠Th2型T淋巴细胞 | 猪呼吸道冠状病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 |
人宫颈非典型鳞状细胞 | 猪副粘病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 |
野生型人c-kit受体细胞株 | 扎伊尔埃博拉病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 |
NCI-H3122人非小肺癌 细胞专用培养基 | 大森林埃博拉病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 |
人APP-PS1(C410Y)双基因转染细胞株 | 苏丹埃博拉病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 |
人APP基因转染CHO细胞株 | 雷斯顿埃博拉病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 |
C3H/An小鼠结缔组织细胞(L929-TK-) | 本迪布焦型埃博拉病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 |
鼬肺上皮细胞 | 小鼠卵泡膜细胞新星诺卡菌染料法荧光定量PCR试剂盒 |
SV40转化的非洲绿猴肾细胞(干细胞库保藏) | 皮诺卡菌染料法荧光定量PCR试剂盒 |
实验后处理:
废弃样本处理:
细胞废弃物消毒:实验后的培养基、细胞悬液需用含有效氯的消毒液处理30分钟后再排放,培养瓶、吸管等耗材需高压灭菌后丢弃。
动物组织处理:剩余的动物组织需放入专用的生物危害垃圾袋,由专业机构进行无害化处理,避免生物污染。
实验设备清洁:
超净工作台清洁:实验结束后用75%酒精擦拭台面,打开紫外灯照射30分钟,关闭风机。
培养箱定期清洁:每周用75%酒精擦拭培养箱内壁和隔板,每2周更换一次培养箱内的水盘,避免滋生细菌。