小鼠成骨细胞
产品信息:
产品名称 小鼠成骨细胞
组织来源 颅骨组织
种属 小鼠
产品规格 5×10^5Cells/T25
英文名称 | Mouse Osteoblast Cells | 规格 | 5×105 |
细胞形态 | 梭形、多角形 | 货号 | P-X1893 |
培养信息:
方法简介:实验室分离的小鼠成骨细胞采用先用胰蛋白酶短时间消化、后用胶原酶反复消化制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:实验室分离的小鼠成骨细胞经ALP染色检测,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称:小鼠成骨细胞
组织来源:颅骨组织
产品规格:5×10⁵Cells/T25培养瓶
培养信息:包被条件
培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:梭形、多角形
传代特性:可传3代左右
消化液:0.25%胰蛋白酶小鼠成骨细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞简介 :
小鼠成骨细胞分离自颅骨组织;颅骨位于脊柱上方,由23块形状和大小不同的扁骨和不规则骨组成。除下颌骨及舌骨外,其余各骨彼此借缝或软骨牢固连结,起着保护和支持脑、感觉器官以及消化器和呼吸器的起始部分的作用。颅分脑颅和面颅两部分。脑颅位于颅的后上部,内有颅腔,容纳脑,共8块。面颅为颅的前下部分,包含眶、鼻腔、口腔等结构,构成面部的支架,共15块。成骨细胞是骨形成的主要功能细胞,负责骨基质的合成、分泌和矿化。骨不断地进行着重建,骨重建过程包括破骨细胞贴附在旧骨区域,分泌酸性物质溶解矿物质,分泌蛋白酶消化骨基质,形成骨吸收陷窝;其后,成骨细胞移行至被吸收部位,分泌骨基质,骨基质矿化而形成新骨;破骨与成骨过程的平衡是维持正常骨量的关键。成骨细胞培养不仅有助于了解骨形成机制、骨骼系统疾病的分子和细胞学基础,也是药物筛选、生物材料开发和生物工程研究的重要手段。
原代细胞接种:
细胞计数与密度调整
使用血球计数板或细胞计数仪准确计数,调整细胞密度至合适范围(不同细胞类型差异较大,一般为1×10⁵-1×10⁶cells/ml)
密度过低:细胞无法分泌足够的生长因子,难以存活;密度过高:细胞竞争营养物质,易出现接触抑制
培养基选择
优先使用原代细胞专用培养基,若使用通用培养基,需添加合适的生长因子、血清等补充成分(如成纤维细胞添加FGF,内皮细胞添加VEGF)
血清浓度:原代细胞培养血清浓度一般为10%-20%,部分特殊细胞(如神经细胞)需使用无血清培养基
培养环境控制
温度:哺乳动物细胞一般为37℃,鸟类细胞38.5℃,昆虫细胞27℃
CO₂浓度:大多数细胞需要5%CO₂,维持培养基pH在7.2-7.4之间
湿度:培养箱湿度保持在70%-80%,避免培养基蒸发过快
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原代细胞实验注意事项:
取材要快、要新鲜、全程无菌
组织离体时间越短越好,冰上操作,减少缺血损伤。
严格控制细胞代数
原代细胞只建议用 P0~P3,代数越高越容易分化、结果越不可靠。
接种密度宁高不低
原代细胞普遍怕稀,太稀不贴壁、不生长、容易凋亡。
消化是关键,宁轻勿重
胰酶 / 胶原酶只消化到细胞变圆就终止,过度消化必死一批。
吹打轻柔,避免机械损伤。
培养基和血清不要随便换批次
血清、基础培养基、添加因子固定厂家固定批次,换批次必须先预实验。
避免频繁折腾细胞
少开培养箱门,不反复观察、不反复拿进拿出,温度、pH 波动对原代杀伤极大。