大鼠肌酸激酶同工酶MB(CKMB)ELISA试剂盒 新品

产品介绍：

大鼠肌酸激酶同工酶MB（CK-MB）ELISA试剂盒是一种用于定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆及细胞培养上清液等生物样本中CK-MB含量的科研工具，广泛应用于心肌损伤、炎症等疾病研究。试剂盒基于双抗体夹心ELISA原理，通过特异性抗体识别CK-MB蛋白，具有高灵敏度和特异性。

核心特点

检测原理：双抗体夹心法（Sandwich ELISA），采用预包被的抗CK-MB抗体，结合样本中的CK-MB，再与生物素标记的检测抗体和HRP-链霉亲和素复合物反应，最后用TMB显色。

检测范围：不同品牌试剂盒的检测范围有所差异，常见为1.56–100 ng/mL或31.25–2000 pg/mL。

灵敏度：最低检测限可达0.78 ng/mL或18.75 pg/mL，确保微量样本也能准确检测。

特异性：仅识别大鼠CK-MB，与其他类似蛋白无明显交叉反应。

重复性：板内和板间变异系数通常小于10%，保证实验结果的可靠性。

操作流程

样本准备：血清、血浆（EDTA/肝素抗凝）、组织匀浆（PBS缓冲液研磨，5000×g离心取上清）等。

试剂准备：所有试剂使用前需平衡至室温，洗涤液需按比例稀释。

标准品稀释：用稀释液配制梯度浓度的标准品（如100、50、25、12.5、6.25、3.13、1.56 ng/mL）。

加样孵育：将标准品和样本加入微孔板，37℃孵育一定时间。

洗涤：用洗涤液洗板4–5次，去除未结合物质。

显色测定：加入TMB底物显色，反应终止后用酶标仪在450 nm波长测定OD值。

数据分析：根据标准曲线计算样本CK-MB浓度，颜色深浅与浓度呈正比。

注意事项

样本避免反复冻融，保存于-20℃或-70℃。

试剂盒组分需按说明书储存（2–8℃或-20℃），开封后尽快使用。

实验需设置复孔，确保数据准确性。

本试剂盒仅用于科研，不可用于临床诊断

试剂与样本准备阶段

温度平衡（最容易被忽视的点）

 操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。

后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。

试剂配制

洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。

现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。

样本处理

避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。

离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。

稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。

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ELISA之所以被广泛应用，主要归功于以下几个核心优势：

灵敏度高（抓得准）：

它利用酶的催化放大作用，能将微弱的信号放大，因此可以检测到样本中极低浓度的目标物质（甚至达到皮克级 pg/mL）。哪怕样本里只有微量的病毒、激素或蛋白质，它也能“捕捉”到。

特异性强（瞄得准）：

基于抗原-抗体的特异性结合原理，试剂盒中的抗体通常只与目标物质反应，很少受样本中其他杂质的干扰。这大大降低了假阳性率，结果准确可靠。

操作简便且快速：

相比于一些复杂的仪器分析方法，ELISA的操作流程相对标准化。市面上的试剂盒通常是一套完整的组件，按照说明书进行加样、孵育、洗板、显色即可。整个过程通常在几小时内就能完成。

高通量与适用性广：

它通常采用96孔板或48孔板，一次实验可以同时处理几十个样本，非常适合大规模的流行病学筛查或批量科研实验。此外，它不仅能测蛋白，还能测抗体、激素、药物残留甚至农药，应用领域覆盖了医学、食品安全和环境监测。

安全稳定：

不像放射免疫法那样使用放射性同位素，ELISA使用的是酶标记，对人体和环境无辐射危害，且试剂保存时间较长。