人肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)elisa试剂盒

                                             人肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)elisa试剂盒
1. 概述

肌酸激酶同工酶MB（Creatine Kinase-MB, CK-MB）**是心肌损伤特异性标志物（分子量86kDa），由M和B亚基组成，在急性心肌梗死（AMI）诊断中具有重要临床价值。其血清浓度升高程度与心肌坏死面积正相关，是胸痛鉴别诊断的核心指标。

2. 检测原理

双抗体夹心ELISA（高特异性单抗）：

预包被抗CK-MB单抗（克隆M7）捕获样本中的CK-MB

生物素化抗CK-B亚基抗体（克隆B10）特异性结合

链霉亲和素-HRP催化化学发光反应

发光强度（RLU）与CK-MB浓度成正比（检测范围：1-500 ng/mL）

3. 试剂盒组成

组分  规格  保存条件  关键特性

预包被板  96T（可拆）  2-8℃  高结合力板

CK-MB标准品  1-500 ng/mL  -20℃  WHO标准（NIBSC 11/236）溯源

生物素化抗体  100 μL  -20℃（避光）  仅识别B亚基

化学发光底物  10 mL  2-8℃（避光）  动态范围10?

心肌裂解液  5 mL  -20℃  含蛋白酶抑制剂

4. 样本要求

适用样本：

血清（推荐采血后4h内分离）

血浆（肝素抗凝，避免EDTA）

心肌组织匀浆

特殊处理：

溶血样本（Hb>0.5 g/dL）需备注

剧烈运动后需静息2h采样

稳定性：

4℃保存≤24h

-80℃可保存3个月

5. 实验流程优化

标准曲线建立：

冻干标准品用1mL去离子水复溶

7点梯度稀释（1、5、25、50、100、250、500 ng/mL）

关键步骤：

加样体积：50μL样本+50μL稀释液

一抗孵育：37℃ 90min（振荡300rpm）

化学发光读数：积分时间200ms/孔

质控要求：

空白孔RLU<500

健康人血清质控（<5 ng/mL）

AMI阳性对照（>100 ng/mL）

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