大鼠成纤维细胞生长因子受体4(FGFR4)elisa试剂盒 新品

产品介绍：

大鼠成纤维细胞生长因子受体4（FGFR4）ELISA试剂盒用于定量检测大鼠样本中FGFR4蛋白的表达水平，基于双抗体夹心法原理，具有高灵敏度和特异性。

检测原理：

采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。微孔板预先包被抗-FGFR4抗体，加入标准品或样本后，FGFR4与固相抗体结合，再与生物素化的抗-FGFR4抗体反应，最后加入HRP标记的亲和素，加入显色剂TMB，在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样本中FGFR4的浓度。

2. 适用样本：

血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆等。

3. 检测范围与灵敏度：

检测范围通常为0.15-10ng/mL（具体以说明书为准），灵敏度一般为0.04ng/m。

4. 试剂盒组成：

通常包括预包被抗体的微孔板、标准品、生物素化抗体、HRP标记的亲和素、洗涤液、底物溶液（TMB）、终止液和封板膜等。

5. 操作步骤：

准备：平衡试剂盒至室温，准备样本和试剂。

加样：加入标准品或样本到微孔板中，温育以允许FGFR4与固相抗体结合。

洗板：去除未结合物质，洗涤微孔板。

加酶联物：加入生物素化抗体和HRP标记的亲和素，温育。

显色：加入底物溶液TMB，避光显色。

终止：加入终止液终止反应。

读数：在酶标仪上于450nm波长下测定OD值。

计算：通过标准曲线计算样本中FGFR4的浓度。

6. 应用：

用于研究FGFR4在大鼠生理和病理过程中的作用，如细胞增殖、分化、胚胎发育、组织修复及癌症等。

试剂与样本准备阶段

温度平衡（最容易被忽视的点）

 操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。

后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。

试剂配制

洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。

现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。

样本处理

避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。

离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。

稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。

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ELISA试剂盒的主要优点

ELISA之所以被广泛应用，主要归功于以下几个核心优势：

灵敏度高（抓得准）：

它利用酶的催化放大作用，能将微弱的信号放大，因此可以检测到样本中极低浓度的目标物质（甚至达到皮克级 pg/mL）。哪怕样本里只有微量的病毒、激素或蛋白质，它也能“捕捉”到。

特异性强（瞄得准）：

基于抗原-抗体的特异性结合原理，试剂盒中的抗体通常只与目标物质反应，很少受样本中其他杂质的干扰。这大大降低了假阳性率，结果准确可靠。

操作简便且快速：

相比于一些复杂的仪器分析方法，ELISA的操作流程相对标准化。市面上的试剂盒通常是一套完整的组件，按照说明书进行加样、孵育、洗板、显色即可。整个过程通常在几小时内就能完成。

高通量与适用性广：

它通常采用96孔板或48孔板，一次实验可以同时处理几十个样本，非常适合大规模的流行病学筛查或批量科研实验。此外，它不仅能测蛋白，还能测抗体、激素、药物残留甚至农药，应用领域覆盖了医学、食品安全和环境监测。

安全稳定：

不像放射免疫法那样使用放射性同位素，ELISA使用的是酶标记，对人体和环境无辐射危害，且试剂保存时间较长。