大鼠成纤维细胞生长因子受体4(FGFR4)elisa试剂盒

                                             大鼠成纤维细胞生长因子受体4(FGFR4)elisa试剂盒
一、核心检测信息

检测目标

特异性定量大鼠血清、血浆、组织匀浆（如肝脏、肾脏）或细胞膜蛋白提取物中的 FGFR4，一种酪氨酸激酶受体，通过结合FGF19/FGF23调控胆汁酸代谢、磷酸盐稳态及肿瘤发生。

检测原理

双抗体夹心ELISA：

预包被抗大鼠FGFR4单抗（靶向胞外Ig-like结构域）捕获目标蛋白 → 生物素标记二抗（识别近膜区）结合 → HRP-链霉亲和素-TMB显色系统（450nm/630nm双波长校正）。

 二、技术参数与验证

关键指标  技术说明

检测范围  0.5-60 ng/mL（7梯度点）

最低检测限  0.15 ng/mL（可检测低表达样本）

样本兼容性  血清（避免反复冻融）、肝组织膜蛋白提取物（含1% CHAPS）、肿瘤细胞裂解液

磷酸化状态检测  可选配抗p-FGFR4（Tyr642）抗体检测激活态受体

批内/批间CV  ＜7%/＜11%

三、典型应用场景

代谢疾病研究

非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）中FGFR4/FGF19轴对胆汁酸合成的调控

肿瘤靶向治疗

肝癌细胞FGFR4过表达与靶向药物（如FGF401）敏感性的相关性分析

骨骼发育

FGFR4基因突变大鼠模型中磷酸盐代谢异常的机制研究

四、操作关键要点

样本处理

膜蛋白提取：需使用含蛋白酶/磷酸酶抑制剂的膜裂解缓冲液（如含0.5% Triton X-114）

血清样本：建议添加10mM EDTA防止金属离子依赖性降解

实验优化

高浓度样本需1:5-1:20稀释（使用含0.1% BSA的TBS缓冲液）

每板设置FGF19刺激阳性对照（100ng/mL处理肝细胞裂解物）

五、注意事项

干扰因素

高浓度肝素（＞1 IU/mL）会竞争性抑制FGFR4与配体结合

数据解读

建议联合检测FGF19和α-Klotho以评估信号通路完整性

保存规范

未开封试剂盒4℃保存（有效期12个月），标准品-80℃分装（含5%甘油防冻）

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