大鼠C-型钠尿肽(CNP)ELISA试剂盒 新品

大鼠C-型钠尿肽(CNP)ELISA试剂盒

产品简介:

一、试剂盒核心信息

检测目标：大鼠CNP，一种由血管内皮细胞和中枢神经系统分泌的肽类激素，属于钠尿肽家族，主要参与血管舒张、骨生长和电解质平衡调控。

方法学：竞争性ELISA（主流方案），特异性检测完整CNP分子（检测波长450 nm）。

适用样本：血浆（EDTA抗凝首选）、脑脊液、组织匀浆（如血管、脑，需添加蛋白酶抑制剂）。

 二、关键组分与性能特点

1. 主要组分

预包被板：抗大鼠CNP多克隆抗体包被的96孔板（部分品牌提供可拆卸条板）。

标准品：合成大鼠CNP（浓度梯度通常为5–500 pg/mL，覆盖生理和病理范围）。

检测系统：CNP竞争结合生物素标记的CNP类似物，链霉亲和素-HRP显色（TMB底物）。

辅助试剂：样本提取液（含肽酶抑制剂，防止降解）。

2. 性能参数

灵敏度：最低检测限可达1 pg/mL（超敏版本可至0.3 pg/mL）。

特异性：不与大鼠ANP、BNP交叉反应，但可能识别CNP前体（需确认抗体表位）。

稳定性：未开封试剂盒4℃保存有效期至2026年（标准品需-20℃冻存）。

三、实验流程与优化建议

1. 典型步骤

① 样本预处理（血浆需抑肽酶处理，脑脊液直接检测）→ ② 加样与生物素-CNP竞争结合（4℃过夜）→ ③ 洗涤→ ④ 加酶标二抗（1小时）→ ⑤ 显色终止→ ⑥ 读数（450 nm，参考630 nm校正）。

2. 关键注意事项

样本保存：CNP易降解，采集后立即冰上处理，-80℃保存（避免反复冻融）。

干扰排除：高脂血症样本需超速离心（100,000×g）去除脂蛋白。

标准曲线：竞争性ELISA需反向拟合（吸光度与浓度负相关）。

四、应用场景

心血管研究：CNP在肺动脉高压、动脉粥样硬化中的血管保护作用。

骨代谢疾病：软骨发育不全（如侏儒症）模型的CNP替代治疗评估。

神经科学：CNP在中枢神经系统（如海马）的突触可塑性调控。

五、时效性提示

技术更新：2025年部分品牌推出“化学发光竞争法”，动态范围扩展至0.1–1000 pg/mL。

替代方案：若需定位CNP表达，建议结合免疫组化（IHC）或原位杂交。

如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：

稀释线性实验 (Linearity)：

操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。

预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。

干扰实验 (Interference Test)：

操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。

预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。

回收实验 (Recovery Test)：

操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。

预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。

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试剂盒组分应按说明储存，使用前平衡至室温。

实验中需避免交叉污染，建议使用一次性吸头。

充分混匀对实验结果至关重要。

试剂盒仅供研究使用，不可用于临床诊断。