大鼠C-型钠尿肽(CNP)ELISA试剂盒

用途

本试剂盒用于体外定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆液、细胞上清液及其他生物液体中的C-型钠尿肽（CNP）含量，适用于科研用途，不用于临床诊断。

检测原理

采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。具体步骤如下：

固相抗体包被：微孔板预包被纯化的大鼠CNP抗体。

抗原-抗体结合：样本中的CNP与固相抗体结合后，加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体，形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。

显色反应：洗涤后加入底物TMB，在HRP催化下产生蓝色产物，酸性终止液作用后转为黄色。

定量分析：在450 nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样本中CNP浓度。

试剂盒组成

96孔配置：

预包被微孔板（96T）

CNP标准品（浓度梯度）

HRP标记检测抗体

浓缩洗涤液（30 mL，20×）

TMB显色底物

终止液

封板膜、说明书

48孔配置：

半块微孔板（48T）

其他组分按比例减少

样本要求

血清/血浆：采集后离心去除颗粒物，避免溶血或反复冻融。

细胞上清液：离心去除沉淀后分装保存于-80℃。

组织样本：匀浆后离心取上清液检测。

操作步骤

标准品稀释：按说明书梯度稀释。

加样与孵育：每孔加入标准品或样本，37℃孵育1小时。

洗涤：洗板5次，去除未结合物。

酶标抗体孵育：加入HRP标记抗体，37℃孵育30分钟。

显色与终止：加入TMB避光显色15分钟，终止后30分钟内检测。

注意事项

试剂盒保存于2-8℃，复溶后标准品需分装冻存。

避免交叉污染，不同批次组分不可混用。

显色时间需严格控制，终止后颜色稳定性有限。

计算与结果

以标准品OD值绘制标准曲线（四参数拟合），样本浓度需落在曲线线性范围内。

性能参数

灵敏度：通常≤1.0 pg/mL

检测范围：5–1000 pg/mL（具体以实际标准曲线为准）

精密度：板内变异系数<10%，板间<15%

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