大鼠Bcl2关联X蛋白(Bax)ELISA试剂盒 新品

产品介绍：

大鼠Bcl2关联X蛋白(Bax)ELISA试剂盒是一种用于体外定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中Bcl2关联X蛋白(Bax)含量的试剂盒。该试剂盒基于双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）原理，通过特异性抗体与抗原的结合，实现对Bax蛋白的高灵敏度检测。

检测原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法。预先包被有大鼠Bcl2关联X蛋白(Bax)捕获抗体的微孔板，加入待测样本或标准品后，再加入HRP标记的检测抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。经过洗涤后，加入底物TMB显色，TMB在HRP的催化下由蓝色变为黄色。颜色的深浅与样本中Bax蛋白的浓度呈正相关。使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样本浓度。

主要特点

灵敏度高：最低检测限可达到0.236ng/m。

特异性强：仅识别大鼠组织标本中的Bax蛋白，与其他类似蛋白无明显交叉反应。

重复性好：板内和板间变异系数均小于10%。

检测范围广：检测范围为0.625-40ng/m。

样本处理及要求

血清：室温凝固后离心取上清，或-20℃保存。

血浆：使用EDTA或肝素抗凝，离心后取上清。

组织匀浆：用PBS冲洗组织，称重后剪碎并充分研磨，离心取上清。

细胞培养上清：离心去除颗粒，取上清检测。

注意事项

所有试剂在使用前需平衡至室温，使用后立即冷藏保存。

洗板动作要轻柔，避免强光直射。

样本避免反复冻融，以防影响检测结果。

试剂盒仅用于研究用途，不得用于医学诊断。

试剂盒组成

预包被抗体的96孔板

标准品（浓度范围0.625-40ng/mL）

HRP标记的检测抗体

样品稀释液、洗涤液、显色剂、终止液。

操作步骤

加样：设置空白孔、标准孔和样品孔，加入相应试剂。

温育：37℃孵育一定时间。

洗涤：用洗涤液充分洗涤微孔板。

显色：加入TMB显色液，37℃避光反应。

终止：加入终止液，终止反应。

测定：酶标仪450nm测定OD值，绘制标准曲线并计算样本浓度。

试剂与样本准备阶段

温度平衡（最容易被忽视的点）

 操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。

后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。

试剂配制

洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。

现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。

样本处理

避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。

离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。

稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。

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ELISA试剂盒的主要优点

ELISA之所以被广泛应用，主要归功于以下几个核心优势：

灵敏度高（抓得准）：

它利用酶的催化放大作用，能将微弱的信号放大，因此可以检测到样本中极低浓度的目标物质（甚至达到皮克级 pg/mL）。哪怕样本里只有微量的病毒、激素或蛋白质，它也能“捕捉”到。

特异性强（瞄得准）：

基于抗原-抗体的特异性结合原理，试剂盒中的抗体通常只与目标物质反应，很少受样本中其他杂质的干扰。这大大降低了假阳性率，结果准确可靠。

操作简便且快速：

相比于一些复杂的仪器分析方法，ELISA的操作流程相对标准化。市面上的试剂盒通常是一套完整的组件，按照说明书进行加样、孵育、洗板、显色即可。整个过程通常在几小时内就能完成。

高通量与适用性广：

它通常采用96孔板或48孔板，一次实验可以同时处理几十个样本，非常适合大规模的流行病学筛查或批量科研实验。此外，它不仅能测蛋白，还能测抗体、激素、药物残留甚至农药，应用领域覆盖了医学、食品安全和环境监测。

安全稳定：

不像放射免疫法那样使用放射性同位素，ELISA使用的是酶标记，对人体和环境无辐射危害，且试剂保存时间较长。