大鼠Bcl-2相关X蛋白(BAX)ELISA试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）定量检测大鼠样本（血清、血浆、细胞培养上清液等）中的Bcl-2相关X蛋白（BAX）。通过特异性抗体结合与酶催化显色反应，实现高灵敏度和高特异性的检测。

检测原理

双抗体夹心法：微孔板预包被抗大鼠BAX捕获抗体，加入样本或标准品后，BAX与抗体结合；

HRP标记检测：加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的二抗，形成“捕获抗体-BAX-HRP二抗”复合物；

显色反应：加入TMB底物，在HRP催化下产生蓝色产物，终止液酸化后转为黄色，450nm波长下测定吸光度（OD值），OD值与BAX浓度正相关。

试剂盒组成

预包被微孔板（96T/48T）

标准品（800pg/ml，需按说明书稀释）

空白对照

生物素标记抗BAX抗体（即用型）

HRP标记亲和素（即用型）

洗涤缓冲液（需按比例稀释）

TMB显色液及终止液

样本处理与保存

血清/血浆：采集后离心（3000rpm，10-30分钟），避免溶血或反复冻融。

短期保存：2-8℃可存48小时；

长期保存：-20℃（1个月）或-70℃（6个月）。

细胞上清液：离心去除颗粒后分装冻存。

特殊样本：部分激素类需添加抑肽酶。

操作步骤

标准品稀释：按梯度稀释至目标浓度（如1000pg/ml→0pg/ml）。

加样与孵育：每孔加入样本或标准品50μl，37℃孵育30分钟。

洗涤：手工（拍干后加洗涤液浸泡）或自动洗板机清洗5次。

显色与终止：加入TMB避光显色15分钟，终止后30分钟内检测OD值。

注意事项

避免试剂交叉污染或反复冻融；

洗涤需彻底，防止假阳性；

显色时间需严格控制，避免过度反应；

不同批次试剂不可混用。

技术参数

检测范围：15-1000pg/ml（具体以标准曲线为准）；

灵敏度：<5pg/ml；

精密度：板内/板间变异系数（CV）均<10%。

适用样本类型

体液、血清、血浆、组织匀浆、细胞上清液等。

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