小鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒 新品

产品特点：

高灵敏度与特异性：采用双抗体夹心法，灵敏度通常为4.69-6.9 pg/mL，特异性识别TNF-α，与其他结构类似物无明显交叉反应。

检测范围广：通常为7.81-500 pg/mL或31.25-2000 pg/mL。

适用样本类型多样：适用于血清、血浆、细胞培养上清液等多种标本类型。

操作简便：试剂盒提供预包被抗体的酶标板，简化了实验步骤，适合科研实验室使用。

稳定性好：试剂盒在2-8℃保存条件下有效期为6-12个月。

试剂盒组成

预包被抗体的96孔板：用于固定抗体。

标准品：用于绘制标准曲线，确定样品浓度。

生物素化检测抗体和HRP标记的亲和素：用于形成免疫复合物并催化显色。

洗涤液、显色液、终止液：用于洗涤、显色和终止反应。

实验步骤

加样：加入标准品或样本，37℃孵育。

洗涤：去除未结合物质。

加入生物素化抗体：孵育后洗涤。

加入HRP标记的亲和素：孵育后洗涤。

显色：加入TMB底物，显色后加终止液。

读数：使用酶标仪在450nm波长下读取吸光度，通过标准曲线计算TNF-α浓度。

注意事项

样本处理：正确采集和保存样本，避免反复冻融。

操作规范：严格按说明书操作，避免不同批号试剂混用。

洗涤步骤：充分洗涤，避免非特异性结合。

结果解读：结合标准曲线，准确计算TNF-α浓度。

应用领域

科研研究：用于小鼠TNF-α在炎症反应、免疫调节、细胞凋亡等生理病理过程中的作用研究。

疾病诊断：辅助评估小鼠相关疾病的免疫状态和炎症水平。

试剂与样本准备阶段

温度平衡（最容易被忽视的点）

 操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。

后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。

试剂配制

洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。

现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。

样本处理

避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。

离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。

稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。

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ELISA试剂盒的主要优点

ELISA之所以被广泛应用，主要归功于以下几个核心优势：

灵敏度高（抓得准）：

它利用酶的催化放大作用，能将微弱的信号放大，因此可以检测到样本中极低浓度的目标物质（甚至达到皮克级 pg/mL）。哪怕样本里只有微量的病毒、激素或蛋白质，它也能“捕捉”到。

特异性强（瞄得准）：

基于抗原-抗体的特异性结合原理，试剂盒中的抗体通常只与目标物质反应，很少受样本中其他杂质的干扰。这大大降低了假阳性率，结果准确可靠。

操作简便且快速：

相比于一些复杂的仪器分析方法，ELISA的操作流程相对标准化。市面上的试剂盒通常是一套完整的组件，按照说明书进行加样、孵育、洗板、显色即可。整个过程通常在几小时内就能完成。

高通量与适用性广：

它通常采用96孔板或48孔板，一次实验可以同时处理几十个样本，非常适合大规模的流行病学筛查或批量科研实验。此外，它不仅能测蛋白，还能测抗体、激素、药物残留甚至农药，应用领域覆盖了医学、食品安全和环境监测。

安全稳定：

不像放射免疫法那样使用放射性同位素，ELISA使用的是酶标记，对人体和环境无辐射危害，且试剂保存时间较长。