小鼠血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)ELISA试剂盒

产品介绍：

原理与方法

检测原理：采用双抗体夹心法，利用特异性抗体与ANGPTL4蛋白结合，通过酶促反应显色，颜色深浅与蛋白浓度成正比。

检测范围：通常为0.156-10ng/mL。

灵敏度：一般为0.065-0.094ng/mL。

组分与规格

规格：常见的规格有48T和96T，满足不同实验需求。

组分：包括预包被酶标板、标准品、样品稀释液、生物素化检测抗体、SABC复合物、TMB显色液、终止液、浓缩洗涤液等。

性能与优势

特异性：高度特异性抗体，避免交叉反应，确保检测准确性。

重复性：严格控制批内差和批间差，CV值分别小于8%和10%，保证结果可重复。

稳定性：试剂盒在2-8℃下可保存6个月，性能稳定。

便捷性：即开即用，无需抗体包被过夜，节省实验时间。

操作步骤

准备试剂与样本：按说明书准备试剂，处理样本。

加样与温育：加入标准品或样本，37℃温育，使抗原抗体充分反应。

洗板：彻底洗涤，去除未结合成分。

加酶标抗体：加入酶标抗体，再次温育和洗板。

显色与终止：加入显色液，显色后加终止液终止反应。

测定OD值：使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度。

计算浓度：根据标准曲线计算样本中ANGPTL4的浓度。

适用样本与注意事项

适用样本：血清、血浆、细胞培养上清液等生物体液。

注意事项：

试剂盒仅供科研使用，不可用于临床诊断。

洗涤过程需充分，避免影响结果准确性。

实验时需佩戴手套，避免污染试剂盒。

样本需避免反复冻融，防止蛋白降解。

试剂与样本准备阶段：

温度平衡（最容易被忽视的点）

 操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。

后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。

试剂配制

洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。

现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。

样本处理

避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。

离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。

稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。

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