小鼠血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)ELISA试剂盒

产品概述

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），专用于定量检测小鼠血清、血浆、细胞培养上清液等样本中的ANGPTL4蛋白含量。具有高灵敏度（检测范围：0.156–10 ng/mL或1.2–50 ng/mL，依规格不同）和特异性，适用于生物医学研究及药物开发领域。

实验原理

固相包被：微孔板预包被抗小鼠ANGPTL4抗体，捕获样本中的目标蛋白。

抗原-抗体结合：加入样本后，目标蛋白与固相抗体结合，洗涤去除未结合物质。

酶标抗体反应：加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体，形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。

显色与检测：加入TMB底物，在HRP催化下显色（蓝色→黄色），450 nm波长测定吸光度（OD值），浓度与OD值呈正相关。

试剂盒组成

预包被微孔板（48孔或96孔）

标准品（浓度梯度）

HRP标记检测抗体

TMB显色液、终止液

洗涤缓冲液

说明书及标准曲线模板

样本要求

样本类型：血清、血浆、细胞上清液等。

体积：50–100 μL/孔（避免溶血或反复冻融）。

保存：2–8℃短期保存，长期需分装冻存于-20℃以下。

操作步骤

标准品稀释：按说明书梯度稀释。

加样与孵育：每孔加入样本或标准品，37℃孵育1–2小时。

洗涤：弃液后使用洗涤缓冲液洗板3–5次。

酶标抗体反应：加入HRP标记抗体，37℃孵育1小时。

显色与终止：加入TMB避光显色15分钟，终止液终止反应。

检测：450 nm读取OD值，绘制标准曲线计算浓度。

注意事项

重复性：板内、板间变异系数<10%。

保存条件：试剂盒需2–8℃避光保存，有效期见外包装。

仪器：需使用450 nm滤光片的酶标仪。

安全：终止液含强酸，避免接触皮肤。

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