小鼠硒蛋白P1(SEPP1)ELISA试剂盒 新品

小鼠硒蛋白P1(SEPP1)ELISA试剂盒

产品简介:

试剂盒基本原理

采用酶联免疫吸附测定（ELISA）技术，通常利用夹心法进行检测。使用两个特异性抗体分别捕获和检测SEPP1，适用于更高灵敏度的检测。

试剂盒组成

预包被微孔板：固相载体，吸附捕获抗体。

标准品：已知浓度的SEPP1溶液（梯度稀释）。

酶标试剂：辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体。

底物A/B液：显色剂（如TMB）。

终止液：终止显色反应。

洗涤液：用于洗去未结合物质。

封板膜：防止孔间污染。

说明书：操作指南及数据解读。

操作步骤

样本处理：血清/血浆样本需离心分离，避免溶血或脂血；组织匀浆需匀浆后离心取上清，并按说明书比例稀释。

加样：加入标准品、样本及空白孔。

孵育：室温（通常1-2小时）孵育，使抗原-抗体充分结合。

洗涤：用洗涤液洗板3-5次，去除未结合物质。

加酶标试剂：加入酶标二抗（或检测抗体），二次孵育。

显色与终止：加入底物显色（10-15分钟），终止液终止反应。

读数：用酶标仪在450 nm波长测定OD值，绘制标准曲线计算浓度。

注意事项

样本要求：避免反复冻融，样本需新鲜或分装-80℃保存。

实验控制：设立空白对照、复孔及标准曲线，确保数据可靠性。

操作规范：严格避免交叉污染，加样时更换枪头。洗涤要彻底，避免背景偏高。

结果分析：标准曲线线性范围需覆盖样本浓度，超出范围需稀释或浓缩样本。

试剂盒性能

检测范围：通常为1.56-100ng/mL。

灵敏度：0.938ng/mL。

特异性：可检测重组或天然的SEPP1，不与其它细胞因子交叉反应。

重复性：板内、板间变异系数均小于10%。

适用范围

主要用于科研领域，不能用于临床诊断。

如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：

稀释线性实验 (Linearity)：

操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。

预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。

干扰实验 (Interference Test)：

操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。

预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。

回收实验 (Recovery Test)：

操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。

预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。

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注意事项

科研用途：仅供科研实验使用，不可用于临床诊断。

操作规范：严格按照说明书操作，避免交叉污染，确保实验结果准确。