小鼠黄体激素(LH)ELISA试剂盒 新品

产品介绍：

检测原理

采用双抗体夹心法，用抗小鼠LH抗体包被酶标板，加入标准品或样本后，LH与包被抗体结合。再加入生物素化的抗LH抗体和HRP标记的亲和素，形成免疫复合物。加入TMB底物显色，颜色深浅与LH浓度正相关，通过酶标仪测定OD值，绘制标准曲线计算样本浓度。

产品性能

检测范围：一般为1-50 mIU/ml或0.31-20 ng/mL。

灵敏度：通常为0.5 mIU/ml或0.19 ng/mL。

特异性：仅检测小鼠LH，与其他相关蛋白无交叉反应。

精密度：板内和板间变异系数均小于10%或15%。

试剂盒组成

预包被抗体的酶标板、标准品、生物素标记抗体、HRP标记亲和素、洗涤液、底物液、终止液、封板膜等。

样本处理

血清/血浆：离心后取上清，-20℃或-80℃保存，避免反复冻融。

组织裂解液：匀浆后离心取上清。

操作步骤

设置标准品和样本孔，依次加入试剂，温育、洗涤后显色，酶标仪测定OD值，计算浓度。

存储条件

未开封试剂盒避光保存于2-8℃，有效期6个月。

适用样本

血清、血浆、细胞培养上清液、组织匀浆等。

操作步骤

准备试剂和样本：平衡试剂盒至室温，制备标准品和样本。

加样：在酶标板孔中加入标准品、样本和相关试剂。

温育：37℃温育一定时间，使抗原抗体充分反应。

洗涤：洗去未结合的物质，避免干扰。

加酶标抗体：加入HRP标记的链霉亲和素，再次温育。

再次洗涤：洗去多余的酶标抗体。

试剂与样本准备阶段：

温度平衡（最容易被忽视的点）

 操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。

后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。

试剂配制

洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。

现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。

样本处理

避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。

离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。

稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。

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