小鼠黄体激素(LH)ELISA试剂盒

检测目的

本试剂盒用于定量检测小鼠血清、血浆、细胞培养上清液及其他生物体液中的促黄体激素（LH）含量，适用于科研用途，不适用于临床诊断。

实验原理

双抗体夹心法：

采用抗小鼠LH单克隆抗体预包被酶标板，形成固相抗体。

样本中的LH与固相抗体结合后，加入生物素化抗小鼠LH抗体，形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。

辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素与生物素结合，催化底物TMB显色，颜色深浅与LH浓度呈正相关。

终止反应后，于450 nm波长测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样本浓度。

试剂盒组成

96孔配置：

预包被酶标板（96孔）

标准品（50 ng/瓶，2瓶）

酶标抗体工作液（12 mL）

生物素化抗体工作液（12 mL）

10×标本稀释液（12 mL）

20×浓缩洗涤液（50 mL）

TMB底物溶液（12 mL）

终止液、封板膜、密封袋及说明书。

样本要求

样本类型：血清、血浆、细胞上清液、组织匀浆等。

处理建议：

避免反复冻融，离心去除颗粒物，2-8℃短期保存（≤24小时），-20℃或-80℃长期保存。

操作步骤

标准品稀释：按说明书梯度稀释至工作浓度。

加样：每孔加入样本或标准品（100 μL），37℃孵育90分钟。

洗涤：弃液后加入洗涤液，重复5次。

加酶标抗体：每孔加入生物素化抗体（100 μL），37℃孵育60分钟。

显色：加入TMB底物（90 μL），避光反应15-30分钟。

终止与检测：加入终止液（50 μL），立即测定450 nm OD值。

注意事项

试剂盒保存于2-8℃，使用前平衡至室温。

避免交叉污染，不同批次试剂不可混用。

显色时间需严格控制，终止后10分钟内完成检测。

计算与结果

以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线，通过四参数拟合方程计算样本浓度。

技术参数

灵敏度：通常≤0.1 ng/mL。

检测范围：1-50 ng/mL（具体以实际标准曲线为准）。

精密度：板内变异系数（CV）<10%，板间CV<15%。

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