小鼠促红细胞生成素(EPO)ELISA试剂盒 新品

小鼠促红细胞生成素(EPO)ELISA试剂盒

产品原理:

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。预先包被高亲和力酶标板的特异性抗小鼠EPO抗体，加入标准品和待测样本后，样本中的EPO与固相抗体结合。经过洗涤去除未结合物质，加入生物素化的检测抗体和辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素，形成免疫复合物。加入显色底物TMB，颜色深浅与EPO浓度成正比，通过酶标仪在450nm波长处测定吸光度，绘制标准曲线，计算样本中EPO的浓度。

检测性能

灵敏度：最低检测限为58pg/ml，部分试剂盒灵敏度可达9.375pg/ml。

特异性：与小鼠TPO无交叉反应，特异性高。

重复性：板内、板间变异系数均小于10%，重复性好。

检测范围

不同试剂盒的检测范围有所差异，通常为15.625-1000pg/ml或31.25-2000pg/ml。

样本类型

适用于血清、血浆、细胞培养上清液、细胞裂解液或组织裂解液等生物样本。

试剂盒组成

一般包括预包被微孔板、酶标二抗、标准品、样品稀释液、洗涤缓冲液、封闭液、底物溶液、终止液、板封膜和说明书等。

操作步骤

加入标准品或样品，孵育。

加入生物素化抗体，孵育。

洗涤。

加入酶结合物，孵育。

洗涤。

加入底物溶液，显色。

加入终止液，测定吸光度。

注意事项

试剂盒应在有效期内使用，避免不同批号试剂混用。

严格按操作步骤进行，控制温育时间和温度。

洗涤步骤需彻底，避免背景干扰。

样本应避免溶血和反复冻融，确保检测结果准确。

保存条件

标准品：4℃保存1-2周，-20℃保存6个月内有效。

其他组分：4℃保存6个月内有效，严禁冻存。

应用领域

广泛应用于科研领域，用于研究EPO在红细胞生成、缺氧应答、组织保护等方面的作用。

如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：

稀释线性实验 (Linearity)：

操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。

预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。

干扰实验 (Interference Test)：

操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。

预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。

回收实验 (Recovery Test)：

操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。

预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。

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注意事项

科研用途：仅供科研实验使用，不可用于临床诊断。

操作规范：严格按照说明书操作，避免交叉污染，确保实验结果准确。