啮蚀艾肯菌染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

检测原理

基于SYBR Green荧光染料法，通过特异性引物扩增啮蚀艾肯菌的靶基因（如16S rRNA或毒力基因），染料与双链DNA结合后释放荧光信号，实时监测扩增曲线实现核酸定量分析。

核心优势

高灵敏度：最低检测限可达100–500拷贝/μL。

操作简便：预混反应液（含酶、dNTPs等），用户仅需加入模板DNA。

广谱适用性：兼容口腔拭子、血液、组织等样本类型。

内控设计：含阳性对照（人工合成DNA标准品）及阴性对照（无核酸水）。

试剂盒组分

| 组分 | 规格/包装 | 功能说明 |

| 2×SYBR qPCR MasterMix | 500 μL | 预混PCR反应液（含荧光染料） |

| 特异性引物混合液 | 100 μL | 靶基因扩增引物 |

| 阳性对照（1×10⁸拷贝/μL） | 50 μL | 实验有效性验证 |

| 核酸提取试剂（可选） | 20次用量 | 支持免提取裂解样本 |

| 使用手册 | 1份 | 操作流程及质控标准 |

操作流程

样本处理

核酸提取：推荐柱式提取法，或使用试剂盒提供的裂解液直接处理样本。

反应体系配置（20 μL体系示例）：

MasterMix 10 μL + 引物混合液2 μL + 模板DNA 5 μL + 补水至20 μL。

扩增程序（通用参数，需优化）：

预变性：95℃ 10分钟 → 循环扩增（95℃ 15秒 → 60℃ 60秒，40循环）。

数据分析：通过标准曲线计算样本中菌体载量。

注意事项

避免反复冻融试剂，使用前需充分混匀。

实验需设置阴性对照以排除污染。

不同仪器需校准荧光信号采集参数（如FAM/SYBR通道）。

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