小鼠Apelin蛋白(APLN)ELISA试剂盒 新品

小鼠Apelin蛋白(APLN)ELISA试剂盒

产品简介:

产品原理

多数试剂盒采用夹心法或竞争抑制法原理。

夹心法：将抗Apelin蛋白的抗体包被在酶标板上，样本中的Apelin与抗体结合，再加入生物素标记的检测抗体，随后加入辣根过氧化物酶标记的亲和素，形成免疫复合物。加入TMB显色底物后，颜色深浅与Apelin浓度正相关。

竞争抑制法：标准品和样本中的Apelin与一定量的酶标Apelin竞争结合抗体，颜色深浅与Apelin浓度负相关。

检测范围

通常为125-8000 pg/mL。

试剂盒组成

预包被抗体的酶标板。

标准品、样本稀释液。

生物素标记的检测抗体及稀释液。

辣根过氧化物酶标记的亲和素及稀释液。

TMB显色液、终止液。

洗涤液。

操作步骤

标准品和样本准备：倍比稀释标准品，处理样本。

加样反应：加入标准品或样本，孵育后洗涤。

加检测抗体：加入生物素标记抗体，孵育后洗涤。

加酶标亲和素：孵育后洗涤。

显色和终止：加入TMB显色液，避光孵育后加入终止液。

测定吸光度：使用酶标仪在450 nm波长下测定OD值。

结果计算：绘制标准曲线，计算样本浓度。

产品特点

高灵敏度：可检测低至1 pg/mL的Apelin。

高特异性：不与结构类似物交叉反应。

重复性好：板内和板间变异系数均小于10%。

注意事项

样本处理：避免溶血、高血脂样本，标本需离心去除悬浮物。

试剂准备：试剂需恢复至室温，按说明书稀释和配制。

洗涤关键：洗涤不充分会导致OD值升高，需彻底洗涤。

显色控制：显色时间需根据实际情况调整，避免过度显色。

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ELISA试剂盒的主要优点：

ELISA之所以被广泛应用，主要归功于以下几个核心优势：

灵敏度高（抓得准）：

它利用酶的催化放大作用，能将微弱的信号放大，因此可以检测到样本中极低浓度的目标物质（甚至达到皮克级 pg/mL）。哪怕样本里只有微量的病毒、激素或蛋白质，它也能“捕捉”到。

特异性强（瞄得准）：

基于抗原-抗体的特异性结合原理，试剂盒中的抗体通常只与目标物质反应，很少受样本中其他杂质的干扰。这大大降低了假阳性率，结果准确可靠。

操作简便且快速：

相比于一些复杂的仪器分析方法，ELISA的操作流程相对标准化。市面上的试剂盒通常是一套完整的组件，按照说明书进行加样、孵育、洗板、显色即可。整个过程通常在几小时内就能完成。

高通量与适用性广：

它通常采用96孔板或48孔板，一次实验可以同时处理几十个样本，非常适合大规模的流行病学筛查或批量科研实验。此外，它不仅能测蛋白，还能测抗体、激素、药物残留甚至农药，应用领域覆盖了医学、食品安全和环境监测。

安全稳定：

不像放射免疫法那样使用放射性同位素，ELISA使用的是酶标记，对人体和环境无辐射危害，且试剂保存时间较长。