小鼠Apelin蛋白(APLN)elisa试剂盒

产品概述

小鼠Apelin蛋白（APLN）ELISA试剂盒是一种用于定量检测小鼠样本中Apelin蛋白浓度的科研试剂，广泛应用于生命科学研究和生物医学实验。该试剂盒基于双抗体夹心法的原理，通过酶联免疫吸附测定（ELISA）技术，实现对血清、血浆、细胞培养上清液、组织匀浆等多种样本中Apelin蛋白的高灵敏度、高特异性检测。

技术原理

试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附测定法（Sandwich ELISA）：

包被：使用特异性单克隆抗体预包被微孔板，形成固相抗体。

结合：加入待测样本后，样本中的Apelin蛋白与固相抗体结合。

检测：加入生物素标记的检测抗体，形成“固相抗体-抗原-检测抗体”复合物。

显色：加入HRP标记的亲和素和TMB显色底物，HRP催化TMB产生蓝色反应，颜色深浅与Apelin浓度成正比。

终止与读数：加入硫酸终止液使颜色由蓝变黄，在450 nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样本浓度。

 试剂盒组成（典型配置）

组分  数量（96T）

预包被抗体的96孔板  1块（8×12）

标准品（冻干品）  2瓶

生物素标记抗体  1支（1:100稀释）

HRP-亲和素复合物  1支（1:100稀释）

样品稀释液  1×20 mL

洗涤液（浓缩型）  1×20 mL（需稀释25倍）

TMB显色液A/B  各1瓶

终止液（2M HSO）  1瓶

注：不同品牌配置略有差异，建议以说明书为准。

检测性能参数

检测范围：通常为 0.1 mIU/mL – 64 mIU/mL 或 125–8000 pg/mL（依品牌而异）

灵敏度：可检测低至 0.1 mIU/mL 或 pg级浓度

精密度：

批内变异系数（CV）< 10%

批间变异系数（CV）< 15%

特异性：不与其它结构类似物发生交叉反应

适用样本类型

血清、血浆（EDTA、肝素抗凝）

细胞培养上清液

组织匀浆

胸腹水、脑脊液等生物液体

注意事项：

样本应新鲜采集，避免溶血或细菌污染

保存时应分装冷冻（-20℃），避免反复冻融

实验操作要点

试剂准备：所有试剂使用前需平衡至室温（18–25℃），避免37℃直接溶解。

标准品配制：现用现配，倍比稀释，建议做复孔。

洗板：推荐使用自动洗板机，手工洗板时注意避免交叉污染。

显色控制：TMB显色需避光，反应时间不超过30分钟，及时加入终止液。

读数：在10分钟内完成OD值测定，使用双波长（450 nm主波长，630 nm校正波长）。

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