人胚胎干细胞H9；h9(WAO9)

人胚胎干细胞H9；h9(WAO9)

商品属性

产品简介

H9（WA09）人胚胎干细胞系由James Thomson博士于1998年建立，源自人类早期胚胎内细胞团（ICM），具有无限增殖、自我更新及多向分化潜能。该细胞系为国际通用标准株之一，适用于发育生物学、疾病模型构建及再生医学研究。

关键特性：

培养方式：贴壁生长，呈克隆状集落，无需饲养层细胞支持，需使用Matrigel基质胶包被培养器皿。

培养基：推荐使用hESC/iPSC完全培养基或mTeSR™1培养基，可选择性扩增未分化细胞。

冻存规格：1 mL冻存管，细胞密度≥1×10^6个/mL，经检测无支原体、细菌、酵母及真菌污染。

培养条件与方法

试剂准备

hESC/iPSC完全培养基配制（500 mL）

在4℃解冻hESC/iPSC Growth Supplements A/B（避免37℃解冻）。

按比例混合基础培养基与补充剂，4℃保存，封口膜密封后2周内使用。

建议初次培养时配制100 mL以减少浪费。

传代操作

消化步骤：

细胞融合达80%时，以1:4比例传代。

使用4 mg/mL胶原酶IV消化20分钟，加入ROCK抑制剂终止消化。

150 rpm离心15分钟后，用含ROCK抑制剂的培养基重悬，轻柔吹打形成小细胞团（避免单细胞悬液）。

接种密度：推荐0.4×10^4~2×10^4 cells/cm²。

日常维护

每日更换新鲜培养基，观察集落形态，及时去除分化区域。

质量控制

形态学：未分化细胞呈高核质比、紧密排列的克隆状集落。

标志物检测：需定期验证OCT4、NANOG等多能性标志物表达。

无菌检测：定期进行支原体及微生物污染筛查。

注意事项

培养基组分需分装冻存，冻融次数≤2次。

传代时避免过度消化导致单细胞化（影响存活率）。

分化实验需根据目标谱系调整诱导方案（如神经外胚层分化需特定生长因子组合）。
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