h9 Feeder Frec人胚胎干细胞H9 (WA09)

h9 Feeder Frec人胚胎干细胞H9   (WA09)

  细胞特性:

来源：

H9（WA09）系由威斯康星大学Thomson实验室于1998年建立，源自体外受精胚胎囊胚内细胞团（ICM），核型正常（46XX）。

伦理合规：

NIH注册号：NIHhESC-09-0019，符合《国际干细胞研究指南（2021版）》规范。

使用需声明来源并遵守所在国伦理法规（如中国《人胚胎干细胞研究伦理指导原则》）。

2核心生物学特性

（1）多能性标志物

阳性表达：

OCT4、SOX2、NANOG（转录因子）；SSEA-4、TRA-1-60（表面抗原）。

分化潜能：

可定向分化为三胚层（外胚层神经元、中胚层心肌细胞、内胚层肝细胞）。

（2）Feeder-Free培养优势

无饲养层：

避免小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）污染，提高临床转化安全性。

标准化培养基：

常用mTeSR1或StemFlex，含FGF2/TGF-β维持多能性。

3培养标准操作

参数  Feeder-Free条件  关键注意事项

基质包被  Matrigel或Vitronectin（5μg/cm2）  4℃解冻，避免反复冻融

传代  GentlCelDissociation试剂（GCDR）  克隆团块大小建议50-100μm

冻存  mFreSR冻存程序降温  复苏后存活率＞85%

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。

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