人胚肾细胞；HEK-293

产品信息：

一、 HEK-293 细胞基本参数

细胞类型  人胚肾细胞 (Human Embryonic Kidney Cells)

组织来源  胚胎肾组织 (Embryonic Kidney)

背景特性  转染了人腺病毒5型（Ad5）DNA

生长特性  贴壁生长 (Adherent)，但贴壁较弱

细胞形态  上皮细胞样 (Epithelial-like)

生物安全等级  BSL-2

主要应用  病毒包装、蛋白瞬时/稳定表达、转染实验

二、 培养条件与操作指南

�� 1. 推荐培养基体系

HEK-293 细胞营养需求较低，但消耗培养基较快。

基础培养基： DMEM (高糖) 是最常用的选择；部分实验室也使用 MEM 或 EMEM。

添加物：

10% 胎牛血清 (FBS)：提供生长因子。

1% 双抗 (Penicillin/Streptomycin)：预防污染。

可选： 1% 非必需氨基酸 (NEAA)、2 mM L-谷氨酰胺 (Glutamine)。

pH值： 推荐 6.9 - 7.1（该细胞偏嗜酸性环境）。

2. 培养环境

温度： 37℃

气体环境： 5% CO₂ + 95% 空气

湿度： 饱和湿度

�� 3. 传代操作（关键步骤）

⚠️ 核心提示：HEK-293 细胞贴壁非常不牢固，极易脱落，操作必须轻柔。

消化液： 0.25% 胰酶 (Trypsin-EDTA)。

消化时间： 极短，通常室温或37℃下 30秒 - 2分钟。

观察： 显微镜下看到细胞间隙变大、边缘变圆即可。

终止： 加入含血清的培养基终止消化（血清能抑制胰酶）。

吹打： 轻柔吹打混匀，切勿用力过猛，否则细胞很难再贴壁。

离心： 900-1000 rpm 离心 3-5 分钟（视细胞状态而定，有时可直接分瓶）。

分瓶比例： 建议 1:3 至 1:6。

注意： 传代过稀会导致生长缓慢；传代过密容易堆积死亡。

❄️ 4. 冻存与复苏

冻存液： 推荐 70% 完全培养基 + 20% FBS + 10% DMSO。

复苏： 快速 37℃水浴解冻，离心去除冻存液后重悬接种。

⚠️ 三、 培养中的特殊注意事项

“爱脱落”特性：

由于贴壁弱，运输震动或换液时的剪切力都可能导致细胞成片脱落。

补救措施： 如果发现细胞脱落，不要丢弃培养基，离心收集后重新接种，细胞通常能重新贴壁。

细胞聚团：

传代时如果吹打不均匀，细胞容易聚集成团。接种后这些团块会像球一样生长，导致中间细胞因营养不足而死亡。

建议： 传代时务必充分吹散，或使用预冷的培养基以减少聚团。

HEK-293 家族庞大：

HEK-293T： 表达 SV40 Large T 抗原，适合病毒包装和带有 SV40 复制起点的质粒扩增。

HEK-293F： 适合悬浮培养，常用于大规模蛋白表达。

HEK-293E： 适合高效重组蛋白生产。

不同变体的培养基和血清要求可能略有差异，请务必核对具体说明书。

�� 总结

HEK-293 是一种贴壁较弱、生长迅速的上皮样细胞。它的培养难度较低，但操作手法必须轻柔。它是病毒学和分子生物学研究中不可或缺的工具。

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不同类型细胞的特异性（生物特性差异）

不同类型细胞的特异性（生物特性差异）

形态多样性：细胞形态因功能而异，如成纤维细胞呈梭形或多角形，神经细胞有突起，上皮细胞呈多边形紧密排列；细菌细胞多为球形、杆状或螺旋形。

功能特异性：动物细胞依赖线粒体供能，植物细胞具叶绿体进行光合作用；原核细胞（如细菌）无细胞核，真核细胞（如动植物细胞）有核膜包裹的核；某些细胞如酵母细胞可进行出芽生殖，哺乳动物细胞则通过有丝分裂增殖。

生长特性：贴壁细胞需附着表面生长（如成纤维细胞），悬浮细胞可在培养液中自由生长（如血液细胞）；不同细胞分裂速度各异，如肿瘤细胞增殖较快，正常体细胞分裂较慢。