HT29/219人结肠癌细胞

                                                          HT29/219人结肠癌细胞
产品信息：

细胞类型  人结肠腺癌细胞 (Human Colorectal Adenocarcinoma)

组织来源  结肠 (Colon)

供体信息  44岁，高加索女性 (Caucasian Female)

生长特性  贴壁生长 (Adherent)

细胞形态  上皮细胞样 (Epithelial-like)

生物安全等级  BSL-2

主要应用  结直肠癌机制研究、抗肿瘤药物筛选、3D细胞培养

二、 培养条件与操作指南

�� 1. 推荐培养基体系

HT-29/219 细胞的培养基配方通常如下：

基础培养基： MEM (Minimum Essential Medium) 或 McCoy's 5a。

添加物：

10% 胎牛血清 (FBS)：提供营养和生长因子。

1% 非必需氨基酸 (NEAA)：MEM培养基通常需要添加。

1% 双抗 (Penicillin/Streptomycin)：预防细菌污染。

pH值： 7.2 - 7.4。

2. 培养环境

温度： 37℃

气体环境： 5% CO₂ + 95% 空气

湿度： 饱和湿度

�� 3. 传代操作（关键步骤）

HT-29/219 细胞贴壁相对较牢，消化时需要耐心观察。

消化液： 推荐使用 0.25% 胰蛋白酶 - 0.53 mM EDTA。

消化时间： 37℃孵育 1-3 分钟。

观察： 显微镜下观察细胞间隙变大，细胞变圆并开始脱落。

终止： 加入含血清的完全培养基终止消化（血清可抑制胰酶活性）。

吹打： 轻柔吹打使细胞完全脱落并分散。

离心： 1000 rpm 离心 5 分钟，弃上清。

重悬与分瓶： 弃去上清，加入新鲜完全培养基重悬，按 1:2 至 1:4 的比例进行传代（首次传代建议 1:2）。

换液频率： 每 2-3 天换液一次。

❄️ 4. 冻存与复苏

冻存液： 推荐使用 90% FBS + 10% DMSO，或专用无血清冻存液。

复苏： 快速 37℃水浴解冻（约 1 分钟），离心去除冻存液后重悬接种。

⚠️ 三、 培养中的注意事项

运输状态处理（非常重要）：

常温运输（T25瓶）： 收到后请先用 75% 酒精擦拭瓶壁消毒，放入 37℃ 培养箱静置 3-4 小时。注意： 运输过程中可能会有少量细胞脱落漂浮，这是正常现象，离心收集后可继续培养。

干冰运输（冻存管）： 收到后若不立即复苏，应直接转入液氮或 -80℃ 冰箱保存。

细胞形态：

该细胞系在显微镜下呈上皮样，边缘清晰。若发现细胞折光性差或碎片多，需及时离心换液。

消化控制：

该细胞对消化时间比较敏感。严禁消化过度，如果消化时间过长导致细胞完全漂浮且变圆，细胞活性会受到严重影响，可能导致细胞死亡或生长缓慢。

特殊变体：

市场上存在 HT-29/219/GFP（绿色荧光蛋白标记）的版本，用于活体示踪或移植瘤实验。其培养条件与普通 HT-29/219 相同，但需注意在传代约 10 代后，可能需要用嘌呤霉素（Puromycin）筛选以维持荧光标记的稳定性。

�� 总结

HT-29/219 是一种典型的贴壁型人结肠腺癌细胞，其培养难度中等。核心要点是控制胰酶消化时间以及运输后细胞的收集。它在结直肠癌的药物敏感性测试和肿瘤生物学研究中具有重要价值。

公司正在出售的产品：

ADM2 英文名称： 中介素抗体 0.1ml	Rhesus antibody Rh SATB1 核基质结合区结合蛋白1抗体 规格 0.1ml
Anti-Phospho-p63 (Ser455)/FITC 荧光素标记0酸化P63抑制基因抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	Rhesus antibody Rh LASS5 长寿相关基因lASS5抗体 规格 0.2ml
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NOS ELISA Kit 大鼠合成酶Multi-class antibodies规格： 48T	MIP-3 Alpha/CCL20 ELISA Kit 大鼠巨噬细胞炎性蛋白3αMulti-class antibodies规格： 48T
n-DNA-Ab(Human natural deoxyribonucleic acid antibody) ELISA Kit 人抗天然脱氧核糖核酸抗体Multi-class antibodies规格： 48T	MRAP2 英文名称： 黑素皮质素2受体辅助蛋白2抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh B MyB 转录因子MYB相关蛋白B抗体 规格 0.2ml	Cryopyrin 英文名称： 细胞凋亡诱导蛋白NALP3抗体 0.1ml
B27添加剂 (原装) 10ml Gibco	HT29/219人结肠癌细胞Rhesus antibody Rh C15orf41 15号染色体开放阅读框41抗体 规格 0.2ml
Alpha-Synuclein 核突触蛋白(抗原) 0.5mg	CD63/MLA1 溶酶体膜糖蛋白抗原 0.5mg

细胞具体特点如下：

环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。

生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。

传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。

敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。

应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。